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背景:急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)是目前世界范围内导致人类死亡的主要原因之一。随着心脏介入手术的开展和应用,使得急性心肌梗死的死亡率显著降低;但由于急性心肌梗死导致心肌坏死且心肌细胞无再生能力,所以随后可发生心室重构,导致心肌纤维化、心脏扩大和心输出量下降,最终进展为心力衰竭。因此如何维持缺血心肌细胞的存活成为改善急性心肌梗死预后的关键。凋亡(Apoptosis)是细胞死亡的一种重要形式,它是由基因控制的细胞程序性死亡。凋亡是急性心肌梗后引起心肌细胞丢失的重要因素之一,大量研究证实抑制心肌凋亡能减少心肌梗死导致心肌细胞的损失,从而改善心肌梗死后心功能。去肾交感神经术(renal sympathetic denervation,RSD)作为一种新型的治疗顽固性高血压方法,为大家所熟知。已有的研究证明去肾交感神经术能抑制肾素血管紧张素醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)的过度激活,减轻水钠潘留,可以改善心力衰竭。亦有报道,去肾交感神经术能改善心肌梗死后的心肌重构,改善患者预后。但去肾交感神经术是否能通过减轻心肌梗死后心肌细胞凋亡来改善心功能目前尚不明确,其相关机制尚未有相关研究。第一部分去肾交感神经对心肌梗死后大鼠RAAS系统及心功能影响的实验研究目的:明确去肾交感神经术对心肌梗死后RAAS系统、左室重构及心功能的影响。方法:64只雄性清洁级SD大鼠经戊巴比妥麻醉后,采用外科手术方法剥除肾交感神经,再用10%苯酚无水乙醇溶液浸泡局部,制成去肾交感神经动物模型;3天后采用结扎左前降支方法制成急性心肌梗死模型;然后随机分为四组,假手术组(shamm,n=16),去肾交感神经组(RSD,n=16),假手术+心肌梗死组(MI+sham,n=16),去肾交感神经+心肌梗死组(RSD+MI,n=16)。4周后,所有大鼠均经胸彩超测定左室舒张末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)及收缩末内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)、左室射血分数(LV ejection fraction,LVEF)、左室短缩分数(left ventricular fractional shortening,LVFS);经右侧颈动脉插管测定左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、左室收缩压最大上升速率(maximal rate of left ventricular pressure,dP/dtmax)和左室舒张压最大下降速率(minimal rate of left ventricular pressure,dP/dtmin);用 ELISA 方法测定血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,AngⅡ)、醛固酮(Aldosterone,ALD)和去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平;组织化学染色后,用计算机辅助图像分析系统分析心肌梗死面积、非梗死区心肌胶原含量(collage volume fraction,CVF)。结果:心肌梗死后4周,与sham+MI组相比,RSD+MI组的LVEDD显著降低,而LVEF 和 LVFS 明显改善(P<0.01);RSD+MI 组的 LVEDP、dP/dtmax 和 dP/dtmin较sham+MI组明显改善,且LVSP显著增加(P<0.05);与sham组和RSD组相比,sham+MI组大鼠血清NE、Ang II和ALD明显增加(P<0.01);而RSD+MI组NE、AngⅡ和ALD较Sham+MI组明显降低(674.33±38.01VS 1421.62±301.11,211.94 ±21.0 VS 1032.79 ±251.86,311.8 ±39.1 VS 1103.69 ±326.28,P<0.01);RSD+MI组的左室心肌梗死面积略小于sham+MI组,但无明显统计学差别(36.9 ± 1.8%VS 38.3 ± 2.1,P>0.05);sham+MI 组左室非梗死区的 CVF 明显高于 RSD+MI 组(7.83%±0.85%VS 6.35%±1.24%;P<0.01)。结论:去肾交感神经术能明显减轻急性心肌梗死后大鼠的左室重构和改善心功能。第二部分 去肾交感神经对心肌梗死后大鼠心肌凋亡影响的实验研究目的:明确去肾交感神经术能否减轻心肌梗死后心肌细胞的凋亡。方法:68只雄性清洁级SD大鼠经戊巴比妥麻醉后,制成去肾交感神经动物模型,3天后制成急性心肌梗模型;然后随机分为四组,假手术组(sham,n =17),去肾交感神经组(RSD,n=17),假手术+心肌梗死组(MI+ sham,n=17),去肾交感神经+心肌梗死组(RSD+MI,n=17)。4周后处死大鼠,用TUNEL方法检测凋亡心肌,在显微镜下计算阳性细胞占总细胞数的比值;用RT-PCR方法检测bax,bcl-2,caspase3的mRNA表达水平,用Western blot方法检测bax,bcl-2,caspase3的蛋白表达水平。结果:RSD+MI组心肌细胞凋亡水平明显低于sham+MI组(11.5± 1.12%VS 18.5±1.33%,P<0.01);凋亡因子 Bax 和 caspase-3mRNA 表达水平在 RSD+MI 组明显低于 sham+MI 组(1.73±0.41VS2.49±0.39,1.78±0.14VS2.67±0.23,P<0.01),而bcl-2 mRNA的表达水平在RSD+MI组则是明显升高(0.63±0.10 VS 0.33±0.09,P<0.01);凋亡因子 bax、cleaved caspase-3 和 bcl-2 的蛋白表达变化情况与mRNA变化一致,Bax和caspase-3蛋白表达水平在RSD+MI组明显低于 sham+MI 组(0.58±0.02 VS 0.79±0.10,0.45±0.05 VS 0.62±0.13,P<0.01),而bcl-2蛋白表达水平在RSD+MI组则是明显升高(0.54±0.04 VS 0.36±0.02,P<0.01)。结论:去肾交感神经术能明显减轻急性心肌梗死后大鼠心肌的凋亡。第三部分去肾交感神经对心肌梗死后大鼠心肌凋亡相关分子机制的实验研究目的:明确去肾交感神经术减轻心肌梗死后心肌凋亡的相关分子机制。方法:64只雄性清洁级SD大鼠经戊巴比妥麻醉后,制成去肾交感神经动物模型,3天后制成急性心肌梗模型;然后随机分为四组,假手术组(sham,n =16),去肾交感神经组(RSD,n=16),假手术+心肌梗死组(MI+ sham,n=16),去肾交感神经+心肌梗死组(RSD+MI,n=16)。4周后处死大鼠,用RT-PCR方法检测心肌标本中miRNA-133的表达水平;分别用RT-PCR和Western blot方法检测心肌标本中TGF-β 1的mRNA和蛋白的表达水平。结果:MicroRNA-133的表达在梗死后的sham+MI和RSD+MI组左室心肌明显减低,RSD 能明显增加 MicroRNA-133 的表达(0.58±0.04 VS 0.28±0.03,P<0.01);TGF-β 1 mRNA和蛋白的表达在梗死后的sham+MI和RSD+MI组左室心肌明显升高,而在RSD术后的RSD+MI组TGF-β 1 mRNA和蛋白的表达明显较sham+MI组降低,(1.76±0.08VS2.99±0.30,0.73±0.03VS0.91±0.03,P<0.01)。结论:去肾交感神经术能增加MicroRNA-133的表达和减低的TGF-β 1表达,这可能是RSD能减轻心肌凋亡改善心功能的分子机制之一。