病原体单核细胞增生李斯特菌能够诱导自身侵入非吞噬细胞,侵入过程受到宿主细胞肌动蛋白骨架的紧密调控。我们在本研究中报道了这一侵入过程的一个新的调节因子,磷脂酶D (phospholipase D, PLD)。PLD可以特异性地催化水解细胞膜的重要组成成份-磷脂酰胆碱生成磷脂酸和胆碱,是细胞内的重要信号效应蛋白,参与调控许多重要细胞生理过程,尤其与细胞肌动蛋白骨架重排关系密切。我们发现李斯特菌在内化侵入vero上皮细胞过程中能够刺激宿主PLD的激活。两种PLD的化学抑制剂(1-丁醇,2,3-DPG)预处理细胞能够抑制李斯特菌诱导的PLD激活及李斯特菌的内化侵入。过表达酯酶缺陷型PLD蛋白或沉默内源PLD表达都能抑制李斯特菌的内化侵入。在一系列能够影响侵入能力的缺陷型李斯特菌中,只有内化素B (InlB)缺陷的菌株不能激活宿主细胞的PLD,而纯化的InlB蛋白能够直接通过其细胞表面受体Met来激活宿主细胞PLD活性并能挽救缺陷株对宿主细胞的侵染能力以及激活宿主PLD的能力。进一步,我们发现,李斯特菌和InlB都能诱导细胞内cofilin蛋白的短暂磷酸化。在细胞内表达不能磷酸化的cofilin S3A,或是表达cofilin的特异性磷酸水解酶slingshot 1L,不但显著抑制了李斯特菌的内化侵入,而且能够抑制InlB诱导的PLD激活。相反,在细胞内表达类磷酸化的cofilin (cofilin S3D)可显著抑制李斯特菌的内化侵入,并能挽救cofilin基因沉默细胞中的InlB诱导的PLD激活。最后,在vero细胞中表达能够与cofilin特异性结合的PLD的F-3片段,可抑制InlB诱导的PLD激活和李斯特菌的内化侵入。因此,我们的研究结果显示李斯特菌的InlB可能是一种新的PLD信号激动剂,其可通过cofilin-PLD信号级联调节李斯特菌的内化侵入。