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农药的广泛应用在作物增产保质,提高资源利用率等方面起到关键作用,但滥用农药造成的土壤、水体污染以及对生命体造成的健康影响问题不容小觑。有机磷农药品种繁多,田间复配使用现象普遍,单种农药逐一检测耗时费力。免疫分析技术检测农药残留具有检测灵敏度高,迅速简便等优势,适合应用于有机磷农药多残留快速现场检测。本实验结合分子印迹技术和酶联免疫分析技术,建立了蔬菜中多种有机磷农药残留的快速检测新方法。主要研究结果如下:(1)设计合成有机磷农药通用半抗原,制备酶标半抗原。有机磷农药中间体O,O’-二甲基硫代磷酰氯与4-氨基丁酸在碱性条件下反应,后通过萃取等步骤得到有机磷农药通用半抗原4-(二甲氧基硫代磷酰胺基)丁酸。采用MHS-DCC活泼酯法,将4-(二甲氧基硫代磷酰胺基)丁酸与辣根过氧化物酶(HRP)偶联形成酶标半抗原。(2)仿生抗体的合成。采用分子印迹技术本体聚合法,在96孔酶标板上直接聚合形成亲水性仿生抗体。通过电镜扫描,热重分析实验,证明合成的水相分子印迹膜具有光滑平整的表面及良好的热稳定性。(3)优化实验条件,建立快速检测有机磷农药多残留的仿生酶联免疫新方法。对影响仿生酶联免疫分析方法的条件进行了系统优化。实验结果显示,当酶标半抗原稀释5000倍,敌百虫在pH值为7.37的5%甲醇PBS缓冲液的条件下,该BELISA方法的灵敏度(IC50)和最低检测限(LOD,IC15)分别为12.0 mg L-1和8.0μg L-1。在酶标半抗原稀释5000倍,pH值为6.30的5%甲醇PBS缓冲液条件下,该方法对乙酰甲胺磷的灵敏度(IC50)和最低检测限(LOD,IC15)分别为30.0 mg L-1和12.0μg L-1。本方法对10 mg L-1,15 mg L-1,20 mg L-1三个浓度水平的芦笋样品敌百虫添加回收率为72.1~92.0%;在10 mg L-1,30 mg L-1,50 mg L-1三个浓度水平的芦笋样品乙酰甲胺磷添加回收率为70.0~85.0%。