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CYC(Cycloidea)是高等植物中控制开花对称性的关键基因。通过研究CYC基因的功能,经基因工程方法定向改变花瓣形状,对园艺花卉的品质改良以及改变植物传粉方式都具有重要意义。因此,本论文对CYC基因在蓝猪耳中的功能进行了研究,主要研究结果如下:
1.)为了研究CYC基因的功能,以及探明其对植物开花对称性形成的影响,本论文将构建的1个融合抑制子沉默表达载体35s::CYC-SRDX及由中科院上海植生所罗达教授提供的来源于百脉根和金鱼草的五个超表达载体转入蓝猪耳。
2)将这种融合抑制子沉默表达载体及由中科院上海植生所提供的LjCYC1-GFP、LjCYC2-GFP、CFP-LjCYC2、35s::CFP-AnCYC、35s::AnCYC-YFP分别对蓝猪耳进行了转化;并通过PCR扩增进行了转基因鉴定,成功获得了相应的转化株系。
3)对蓝猪耳转化株系的研究表明,转化LjCYC1-GFP、LjCYC2-GFP、CFP-LjCYC2、35s::CFP-AnCYC、35s::AnCYC-YFP五种超表达载体的株系表型与野生型无明显差异,而转35s::CYC-SRDX抑制载体的株系的花较野生型的要小,每个花瓣的形状也都与野生型的不同,在35s::CYC-SRDX转化株系中,花的背部花瓣与侧部花瓣形状相似;35s::CYC-SRDX转化株系的花色变浅,花瓣上的紫色区域减少;花筒变长;花萼变长;雄蕊花药褐黄,离生;叶片边缘向背面卷曲。
4)通过琼脂糖印迹法可以看出35s::CYC-SRDX转化株系的表皮细胞比野生型的细胞要大,且在35s::CYC-SRDX转化株系中,背部花瓣和侧部花瓣不仅形状相似,而且细胞类型也相似。