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目的:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是典型的全身性自身免疫性疾病,狼疮患者出现免疫细胞表型、功能异常,以及自身凋亡细胞清除障碍,导致体内大量自身抗体产生、免疫复合物沉积及以肾脏为主的多器官损伤。系统性红斑狼疮与体内B细胞过度活化产生大量抗体有关。同时,系统性红斑狼疮是B细胞遗传缺陷发生的最常见的自身免疫性疾病,缺陷发生的原因主要是B细胞过度活化,细胞耐受性遭到破坏,诱导自身抗体的产生。LAPTM5(lysosomal-associated protein transmembrane 5)是在骨髓、胸腺和脾等造血组织中发现的溶酶体相关蛋白,参与吞噬物的溶酶体途径降解,与细胞凋亡及其清除相关,主要在造血组织中表达,是细胞内吞噬及吞饮物的转运者,参与募集泛素化蛋白将其转运至溶酶体进行降解。目前LAPTM5在免疫细胞中的生物学功能仍不清楚,研究发现它参与T、B淋巴细胞表面受体的负性调控和巨噬细胞促炎信号的正性调控,以及树突细胞对脂质抗原的抗原递呈作用,它的表达或活性异常不仅可能引起B细胞免疫活性改变,而且可能造成巨噬细胞对凋亡细胞的清除障碍,细胞内未清除的核酸活化引起自身免疫反应并产生炎症因子,从而导致狼疮病变。NZB小鼠是狼疮模型小鼠,它的狼疮样表现与LAPTM5缺陷小鼠极为相似,实时定量PCR结果显示NZB小鼠较NZW小鼠的LAPTM5 mRNA表达量明显降低,对NZB鼠LAPTM5 mRNA测序结果显示,该基因序列的第656位碱基发生有义突变(A→G),致蛋白C端213位氨基酸序列由赖氨酸变成精氨酸(Lys→Arg),这是否可造成该基因的生物学活性改变,从而影响细胞免疫学活性仍有待研究。本文通过构建LAPTM5野生型和NZB型腺病毒,体外感染小鼠B淋巴细胞系WEHI231,探讨LAPTM5过表达对LPS诱导WEHI231增殖与活化的影响。研究方法:采用qRT-PCR检测RAW264.7、WEHI231和NIH3T3三种细胞系中LAPTM5表达,采用LAPTM5野生型和NZB型腺病毒体外感染WEHI231细胞,采用LPS(1μg/ml)刺激WEHI231细胞,采用qRT-PCR检测细胞内LAPTM5 mRNA的表达变化,证实LAPTM5过表达效果,CCK-8法检测WEHI231细胞增殖能力的变化,采用qRT-PCR检测细胞内IL-6和TNFαmRNA的表达变化,初步探讨LAPTM5过表达对LPS诱导WEHI231细胞增殖与活化的影响。结果:LAPTM5在小鼠巨噬细胞RAW264.7中高度表达,在小鼠B淋巴细胞WEHI231中较低表达,而在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中不表达。感染LAPTM5野生型和NZB型腺病毒的WEHI231细胞中,LAPTM5 mRNA的表达水平显著增加(P<0.05)LAPTM5过表达后,LPS诱导WEHI231增殖能力显著增加,LPS诱导细胞中IL-6和TNFαmRNA的表达水平显著增加(P<0.05),而LAPTM5 NZB型腺病毒对细胞增殖与活化能力的影响与野生型相比并无差异(P>0.05)。结论:LAPTM5过表达可促进LPS诱导小鼠B淋巴细胞WEHI231增殖与活化。