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脊髓损伤(SCI)是一种严重的疾患，多见于外伤后。根据北京地区1988年回顾统计，脊髓损伤发病率为6.8例／百万人／年，低于英、美等发达国家。近年来，脊髓损伤发病率呈上升趋势，交通事故成为致伤首要原因。伤后出现许多并发症，给病人、家庭、社会带来沉重的精神和经济负担。 研究发现，脊髓有一定的修复能力，保护受损的脊髓，减少神经细胞的死亡，是康复的关键因素之一。在脊髓损伤治疗中，如何降低脊髓继发性损伤越来越重要。继发性损伤包括神经细胞的死亡和凋亡。凋亡可由多种因素引起，缺血是凋亡最常见的诱因之一，细胞内高钙、自由基也是很重要的诱因。外科手术可以减压，固定脊柱，加强护理可以减轻并发症。如何用药物干预脊髓损伤，近年来进行了大量的研究。新药物如：甲基强的松龙、神经节苷脂、钙离子拮抗剂、胚胎脊髓移植、雪旺细胞移植、嗅鞘细胞移植、基因治疗。但是临床疗效欠佳。甲基强的松龙是目前公认疗效较好的药物，但费用较贵，长期应用有一定并发症。 已酮可可碱是非选择性磷酸二酯酶抑制剂，可以升高红细胞内的ATP含量，缩小红细胞直径，改善血液的流动性；降低纤维蛋白浓度，加强纤维蛋白溶解，对抗红血球聚集；激活腺苷酸环化酶活性，促进前列环素释放，抑制血小板聚集；对抗氧自由基反应；组织钙离子内流等作用。已酮可可碱见用于心、脑血管疾病，对脊髓损伤有否治疗作用，国内外尚无报道。磷酸二酷酶抑制剂干顶大鼠继发性脊髓损伤的实验研究目的: 观察磷酸二酷酶抑制剂(己酮可可碱)对脊髓继发性损伤的影响，对继发性损伤神经细胞凋亡有否治疗价值，为其临床应用提供实验依据。方法: 选用3一4月龄雄性SD大鼠124只，体重250士309，随机分为:单纯损伤组(SCI)、损伤+甲基强地松龙组(SC卜MP)、损伤十已酮可可碱组(SCI+PTX)。每组40只大鼠，分为4h、sh、24h、3d、7d五个时间点，每个时间点8只大鼠。SC卜 MP组腹腔注射甲基强地松龙，剂量30mg/kg/d;SC卜PTX组腹腔注射已酮可可碱，剂量3Omg/kg/d。观测指标:(l)神经功能评价:第ld、3d、7d进行测试。以美国Tarlov法为准。采用改良的Rivlin和Tator法，进行斜板实验。(2)损伤脊髓含水量、离子含量测定:不同时间点，切取脊髓组织，用Ellieot法计算组织含水量。根据Happel法，将loomg士10 mg脊髓标本制成样本，用原子吸收火焰光谱法测定钠、钾、钙含量。 (3)MDA、SOD含量测定:取IO0mg左右脊髓组织，用硫代巴比妥酸法(TBA)测定丙二醛(MDA):黄嚓吟氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)。 (4)脊髓组织形态学改变:不同时间点，左心室一主动脉灌注4%多聚甲醛，固定组织。切取脊髓组织Icm，固定后，说水、石蜡包埋、连续切片，切片厚3协m，一部分行HE染色:一部分切片后，行TUNEL染色。统计数据用均数士标准差(X士S)表示，在SPSSIO.O统计软件下进行处理。检验水准:a二0.05。结果:1.运动功能评价: SC卜MP组与SC卜PTX组同SCI组比较有显著的改善、P(0.05、，SC卜MP组与SC卜PTX组相比差异无统计学意义‘P)0.0动:郑州大学2004届研究生毕业论文2.脊髓组织含水量、离子(Na‘、Ca卜、K’)测定: SCI组，脊髓组织含水量增加，K‘含量下降，Na+、CaZ‘含量升高，从多方面损伤脊髓。SC卜MP组与SC卜PTX组同SCI组比较组织含水量、Na+含量下降，抑制脊髓细胞的水肿，Ca卜含量下降，阻断Ca卜引起的组织损伤和自由基反应，K‘含量升高，有显著差异(P<0.05);SCI+MP组与SCI+PTX组相比差异无统计学意义(P)0.05)。3.脊髓组织MDA、SOD测定: SCI组，脊髓组织MDA升高，SOD下降，说明自由基反应增强，损伤脊髓组织;SC卜MP组与SC卜PTX组与SCI组比较脊髓组织MDA下降，SOD升高，有效阻断部分自由基反应，保护脊髓组织，有统计学差异(P<0.05);SC卜MP组与SCI十PTX组相比差异无统计学意义 (P> .05)。4.脊髓组织病理、TUNEL观测: SCI组，脊髓组织有出血，血管间隙大量红细胞渗出，出现液化性坏死，有小囊腔形成，组织水肿，轴索与髓鞘空隙增大、散乱，有弥漫性小囊腔，神经细胞肿胀、减少、固缩，并见白细胞浸润，TUNEL可见有大量凋亡细胞出现。SCI+MP组与SCI十PTX组见点片状出血，有液化性坏死，组织水肿，神经细胞固缩，白细胞浸润，TUNEL见凋亡细胞出现，同SCI组比较有一定减轻:SC卜MP组与SC卜PTX组比较无明显差异。结论:1.动物模型建立: Allen’s重物坠击法(weight drop，WD)制作的脊髓损伤动物模型，与人类脊髓损伤的性质相似。重物自后方造成脊髓前后方应力的撞击伤，与临床上脊柱骨折、脱位，脊髓受前后椎管的撞击相似。大白鼠30Ogcf引起完全脊髓损伤，ZO0gcf以下致不完全脊髓损伤，为观察脊髓损伤后神经细胞的凋亡，我们选择中度不完全损伤，重物为109，打击垂直距离scm，致伤力为50gcfa2，脊髓组织含水量、离子‘Na‘、Ca止‘、K一)测定:磷酸二酷酶抑制剂干预大鼠继发性脊髓损伤的实验研究 SC卜MP组与SC卜PTX组与SCI组比较可见脊髓组织含水量、Na+含量较单纯损伤组明显下降，组织水肿减轻;K+含量