目的：克隆大鼠血管紧张素转化酶Ⅰ(Angiotensin I Converting Enzyme,ACE)cD-NA,构建pEGFP-ACE真核表达载体,并在HepG2细胞中表达,为获得稳定表达大鼠ACE的细胞模型做准备,为ACEI类降压药物的筛选提供基础。　　 方法：①pEGFP-ACE基因打靶载体的构建及鉴定:提取大鼠肺脏组织总RNA,利用RT-PCR得到 ACE cD-NA。回收纯化PCR产物并与载体质粒pEGFP-C1同时进行SalI和Acc65I双酶切,经T4DNA连接酶作用后,转化至感受态E.coli DH5α,在含有卡那霉素(30μg/mL)的LB琼脂平板上培养过夜,挑取克隆并酶切筛选。阳性克隆进行测序,用BLAST软件与Gene-Bank数据库进行同源性分析。②HepG2细胞的转染和重组大鼠ACE蛋白的表达及检测:提取重组质粒pEGFP-ACE,在250V,20ms的情况下电转染HepG2细胞。在转染48h后收集细胞,Western blot鉴定重组ACE蛋白的表达情况。　　 结果：①利用RT-PCR成功获得大鼠ACE cDNA,构建pEGFP-ACE重组真核表达载体,挑取克隆,经EcoRI酶切鉴定、测序及BLAST分析,得到重组质粒。②电转染HepG2细胞48h后,Westernblot鉴定转染pEGFP-ACE质粒的HepG2细胞中约180KD处出现条带。　　 结论：成功构建大鼠肺脏ACE基因的真核表达载体pEGFP-ACE,并提示可能在HepG2细胞中表达,为构建大鼠ACE的细胞模型做前期准备。