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目的:本实验采用温针灸联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA),探讨温针灸联合BMSCs移植对兔KOA软骨组织损伤的保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法:选取新西兰大耳兔50只,雌雄各半,随机分成5组:空白组、模型组、温针灸组、BMSCs组、温针灸联合BMSCs组,每组10只。除空白组外其余4组均采用右后肢伸直位固定6周复制兔KOA中期软骨退变模型,并用X线检查造模是否成功,待造模成功后分别予以相应的干预手段,7天为一个疗程,共2个疗程,疗程结束后五组实验兔同时取材。采用改良LequesneMG膝关节评估量表对各组兔患侧膝关节行为学进行评分,彭太平法大体观察兔KOA软骨组织形态学变化,苏木精-伊红、番红-固绿、甲苯胺蓝染色法对兔KOA关节软骨组织进行病理观察,透射电镜观察软骨细胞超微结构及凋亡小体,TUNEL法观察软骨组织中细胞凋亡情况,免疫组化法与qPCR法观察各组关节软骨组织中凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达情况。所得最终实验数值采用SPSS20.0统计学软件分析。结果:1.温针灸联合BMSCs对兔KOA软骨组织损伤的保护作用与空白组相比,模型组兔患侧膝关节肿胀,活动范围明显减少,LequesneMG评分显著增加(P<0.01),软骨组织病理损伤严重,HE染色Mankin’s评分显著升高(P<0.01),番红-固绿、甲苯胺蓝染色见大面积失染,电镜观察超微结构见软骨细胞发生退变,细胞外血管坍塌,局部可见多个凋亡小体。与模型组相比,经温针灸、BMSCs、温针灸联合BMSCs治疗后,关节功能有所恢复,症状减轻,LequesneMG评分明显降低(P<0.01),软骨组织病理损伤程度改善(P<0.01),透射电镜见软骨细胞损伤有所恢复,外周血管略水肿,但血运逐渐恢复,可见少量红细胞。且温针灸联合BMSCs对上述指标的改善作用均优于单纯温针灸与单纯BMSCs移植治疗(P<0.05)。2.温针灸联合BMSCs对兔KOA软骨组织损伤的保护作用机制与空白组相比,模型组TUNEL阳性软骨细胞数量显著增多(P<0.01),且全层可见,软骨细胞中Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);与模型组相比,经温针灸联合BMSCs治疗后可以显著减少软骨细胞凋亡的数量(P<0.01),软骨组织中凋亡相关因子表达明显改善,其中Bcl-2蛋白及mRNA表达显著升高,Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:1.温针灸联合BMSCs移植能够有效抑制兔KOA软骨组织损伤,且作用效果明显优于单纯温针灸与单纯BMSCs,肯定协同增效作用。2.温针灸联合BMSCs移植治疗兔KOA的机理可能是通过降低Bax、Caspase-3表达,上调Bcl-2水平,抑制软骨细胞凋亡,从而发挥治疗KOA的作用。