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设施蔬菜是实现农业现代化的一个重要手段和有效途径,也是我省农业经济发展和农民增收的支柱产业。根结线虫病害是影响设施蔬菜可持续发展的重要因子之一。化学杀线虫剂虽能有效防控根结线虫病害,但往往会造成不同程度的环境污染,严重影响着蔬菜安全和人们的健康,利用拮抗微生物防治根结线虫可减少化学农药带来的环境和健康的危害,对现代农业的可持续发展具有重要的意义。本研究采用离体抑杀南方根结线虫二龄幼虫（J2）筛选出对根结线虫有良好作用效果的6株生防菌;结合形态学特征、生理生化特征和16S r RNA基因序列特征及贝叶斯系统发育关系分析对6株高效生防菌进行种类鉴定;选取其中A-27和A-30菌株进行南方根结线虫J2和卵抑杀效果、盆栽防效和稳定性研究,对2个菌株进行发酵优化应用于温室芹菜根结线虫的大田防治,并对田间防效及根际微生物多样性进行分析,试验结果如下:1.采用稀释涂布平板法从供试根际土壤中共分离出111株细菌菌株,其中51株菌株发酵液表现出对南方根结线虫J2有致死活性,而其中处理24 h后校正死亡率达80%以上的有6株,分别为A-9、A-22、A-25、A-27、A-29和A-30,校正死亡率分别为84.54%、83.17%、97.41%、100.00%、92.64%和81.62%。经形态学特征、生理生化特征、16S r RNA基因序列特征及其贝叶斯系统发育关系分析,鉴定A-9菌株为嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）,A-22和A-25为芸薹假单胞菌（Pseudomonas brassicacearum）、A-27和A-30菌株为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,A-29菌株为假格里尼翁苍白杆菌（Ochrobactrum pseudogrignonense）。选取贝莱斯芽孢杆菌A-27和A-30菌株进行后续试验。2.用不同浓度的A-27和A-30菌株的发酵液、发酵滤液及菌悬液对南方根结线虫J2进行抑杀试验,其中发酵液和发酵滤液对J2的抑杀效果优于菌悬液,发酵液的总体抑杀效果最佳;A-27和A-30菌株发酵液进行番茄根结线虫盆栽防效试验,根结指数显著降低84.61%和76.92%,番茄植株鲜重分别增加17.20%和8.00%,株高增加38.03%和12.41%,根系干重增加32.46%和14.53%。3.A-27和A-30菌株发酵液的最大吸收波长为400 nm;稳定性研究表明,A-27菌株在光照或黑暗、温度在50～100℃之间、pH=4～8及紫外照射条件下,生长状况良好,A-30菌株对光照、pH值及紫外线均不敏感,但其对温度较敏感,在50～100℃之间生长不稳定。4.采用单因素试验和正交试验设计相结合对A-27和A-30菌株的发酵条件进行筛选和优化,结果显示A-27菌株的最佳发酵培养基为蔗糖20 g、蛋白胨50 g和硫酸镁5 g,在pH=7加蒸馏水至1000 m L,培养条件为发酵温度28℃,装液量100/250 m L和接种量7%（7 m L）;A-30菌株最佳发酵培养基为蔗糖15 g、蛋白胨50 g和磷酸氢二钾10 g,在pH=8时加蒸馏水至1000 m L,培养条件为发酵温度28℃、装液量125/250 m L和接种量3%（3.75 m L）。5.A-27和A-30菌株发酵液应用于温室南方根结线虫的田间防治,相对防效可达64.29%和60.71%,能显著降低根结指数和J2的虫口密度,显著提高芹菜植株的株高和地上部鲜重。根际土壤微生物高通量测序结果表明,施用A-27和A-30菌株发酵液能改变土壤微生物的群落结构,提高细菌和真菌的丰富度;其中优势细菌类群有变形菌门、放线菌门、绿弯菌门、厚壁菌门和酸杆菌门,优势真菌类群有子囊菌门、担子菌门和被孢霉门;功能预测分析结果显示,细菌的功能结构没有显著变化,真菌的功能结构变化明显,其中与动植物病原相关功能的相对丰度显著降低。