T淋巴细胞识别自体慢性髓系白血病细胞肿瘤抗原的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qdled2046
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复发是白血病化疗或骨髓移植治疗失败的主要原因,清除体内残留白血病细胞或体外净化自体骨髓以减少回输瘤细胞是减少复发的重要策略。用白细胞介素-2(IL-2)激活的自体免疫效应细胞(LAK细胞)清除体内残留白血病细胞越来越受到重视。然而,LAK细胞对自体慢性髓系白血病(CML)细胞不能杀伤或杀伤活性很低,因而,不能用来体外净化患者的骨髓。本研究旨在运用混合培养淋巴细胞技术,用自体瘤细胞刺激和一些细胞因子扩增CML患者骨髓或外周血单个核细胞(MNC),验证CML患者体内是否存在细胞毒T淋巴细胞前体细胞,并鉴定其表型和功能特征,分析其识别的肿瘤抗原与相应BCR-ABL融合区的关系。主要结果如下: 1.CML缓解期(n=6)和慢性期(n=10)均存在对自体(平均分别为27.5%和23.2%,中位数分别是30.1%和23.3%)和异体CML细胞(平均分别为33.0%和29.1%,中位数分别是33.5%和25.5%)有杀伤活性的T淋巴细胞,这些细胞对自体和异体正常骨髓细胞没有杀伤活性(<10%),对K562(分别为50.1%和40.6%,中位数是47.3%和38.4%)和Raji细胞(在慢性期平均为30.6%,中位数是28.6%)有较强的杀伤活性,对正常粒单祖细胞集落形成单位(CFU-GM)无抑制作用。LAK细胞对自体CML细胞无杀伤活性(<10%),对异体CML细胞有较强的杀伤活性(平均25.6%;n=4)。 2.这些T细胞是CD3~+CD56~+非主要组织相容性抗原(MHC)-限制性T细胞,以及CD3~+CD56~-MHC-限制性T细胞。用自体CML细胞刺激可增加T细胞激活标志CD25和HLA-DR的表达(n=6;p<0.01)。 3.这些T淋巴细胞对自体CML细胞呈现较弱的增殖反应,对异体CML细胞几乎无增殖反应,对载有相应融合区BCR-ABL肽的自体缓解期EBV转染的B细胞也无增殖反应。 4.用照射过的自体CML细胞进行刺激,4周内增加的T淋巴细胞效是对照组的2.5倍(n=10;p<0.01);培养第四周,T淋巴细胞可扩增到320.5倍(n=10;范围85.4~560.2,中位数320.8)。 5.用生物和ELISA法检测这些T细胞能释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒系祖细胞集落刺激因子(G-CSF)和IL-2等细胞因子。 6.这些T细胞不表达BCR-ABL融合基因产物,染色体核型正常,Ph染色体阴性。
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