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蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum是菜粉蝶Pieris rapae蛹期优势内寄生蜂,该蜂仅以毒液抑制寄主免疫。本论文就蝶蛹金小蜂寄生对寄主细胞免疫与生理代谢的影响进行了研究。结果概述如下:1.蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶蛹血细胞的影响光学显微镜观察结果表明,受蝶蛹金小蜂寄生影响最大的是寄主颗粒血细胞与浆血细胞。寄生后这两种血细胞变圆,粘附与延展行为受到抑制,而其它类型血细胞形态上未受影响。然而透射电镜观察结果表明,除囊血细胞外,蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶蛹各类型血细胞均造成不同程度的损伤。2.蝶蛹金小蜂毒液对菜粉蝶蛹血细胞包囊与吞噬反应的影响采用尼龙毛法分离纯化了菜粉蝶蛹颗粒血细胞与浆血细胞。研究了毒液对菜粉蝶蛹包囊反应关键步骤及颗粒血细胞与浆血细胞吞噬反应的影响。结果表明血细胞数量、毒液浓度均显著影响包囊指数。菜粉蝶蛹体外包囊反应试验中,包囊反应的第一步为颗粒血细胞粘附在异物上,毒液的存在虽会减少粘附在异物上的颗粒血细胞数量,但不会完全阻止包囊反应第一步的发生。但毒液的存在能使包囊反应第二步浆血细胞的募集阶段无法进行,导致包囊反应第三步即颗粒血细胞粘附在包囊最外层的浆血细胞上,形成包囊的外围无法实现,最终导致无法形成完整的包囊。菜粉蝶蛹血淋巴浆质对包囊指数无显著影响。菜粉蝶蛹颗粒血细胞是主要具有吞噬能力的血细胞,浆血细胞多少也能吞噬大肠杆菌,毒液能显著抑制颗粒血细胞与浆血细胞吞噬能力,并且这种抑制能力与毒液的剂量正相关。3.蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶蛹血淋巴和脂肪体糖代谢的影响研究了蝶蛹金小蜂寄生24 h,36 h,48 h,60 h和72 h后菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体糖代谢功能。结果表明,经蝶蛹金小蜂寄生的菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体中丙酮酸含量显著降低,乳酸含量显著升高,乳酸脱氢酶活性显著降低,表明进入三羧酸循环的丙酮酸量减少。苹果酸脱氢酶与琥珀酸脱氢酶是线粒体中参与三羧酸循环的关键酶。在被蝶蛹金小蜂寄生的初始阶段,菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体苹果酸脱氢酶活性升高,随着寄生时间的延长,这两种酶活性被显著抑制,说明寄生导致菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体呼吸率降低,菜粉蝶蛹设法从无氧糖酵解获得能量以抵御毒液所带来的压力。4.蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶蛹抗氧化酶活性与抗氧化剂水平的影响寄主昆虫在防御寄生蜂等入侵异物时产生氧胁迫,释放对细胞有毒的活性氧(ROS)。测定了蝶蛹金小蜂寄生24 h,36 h,48 h,60 h和72 h后菜粉蝶蛹血淋巴及脂肪体与氧胁迫相关的抗氧化酶活性与抗氧化剂水平。蝶蛹金小蜂寄生导致菜粉蝶蛹脂肪体超氧化物歧化酶与血淋巴过氧化氢酶活性及血淋巴与脂肪体谷胱甘肽-S-转移酶活性显著下降,说明由于寄生而注入的毒液及菜粉蝶蛹随之产生的大量ROS钝化了上述抗氧化酶活性;而菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体谷胱甘肽还原酶活性与还原型谷胱甘肽水平在整个试验中与对照基本无显著差异,表明寄生并未诱导谷胱甘肽还原酶与还原型谷胱甘肽产生对抗防卫。5.蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶蛹质膜上磷酸酶与转氨酶活性的影响测定了蝶蛹金小蜂寄生24 h,36 h,48 h,60 h和72 h后菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体结合在质膜上磷酸酶与转氨酶活性。经蝶蛹金小蜂寄后生菜粉蝶蛹血淋巴与脂肪体结合在质膜上的Na+/K+/ATPase,Ca2+/Mg2+/ATPase以及总ATPase活性显著降低,丙氨酸转氨酶与天冬氨酸转氨酶活性显著高于对照。这说明经蝶蛹金小蜂寄后生菜粉蝶蛹血细胞与脂肪体细胞质膜流动性降低,并且上述组织可能已产生大范围损伤。