目的:通过检测铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)临床分离株Ⅰ类整合子,探讨其与耐药的关系;分析“中药抗生素”山银花粗提物对Ⅰ类整合子阳性PA的抑菌效果,进一步研究亚抑菌浓度的山银花粗提物对毒力因子及群感基因表达的影响,探明山银花粗提物在亚抑菌浓度下对群体感应系统调控的作用及机制,为开发新型山银花抑菌剂提供理论依据。方法:1.采用VITEK-2 compact细菌鉴定仪器进行菌种鉴定以及药敏试验;琼脂稀释法检测山银花粗提物的抑菌活性;2.PCR技术检测PA临床分离株Ⅰ类整合子及其可变区基因,并对可变区基因测序、比对分析;3.采用报告平板法及紫色杆菌素定量试验判断山银花粗提物对群体感应的抑制作用;倍比稀释法确定山银花粗提物对标准野生型铜绿假单胞菌PA0 1的MI C值,选择1/4 MIC、1/2 MIC、MIC作为实验组;光密度法检测亚抑菌浓度山银花粗提物对毒力因子(绿脓素、弹性蛋白酶、鼠李糖脂)的影响;4.实时荧光定量PCR技术检测亚抑菌浓度的山银花粗提物对PA01群体感应系统相关基因(las I、las R、rhl I、rhl R)表达量的影响。结果:1.Ⅰ类整合子可变区携带的基因盒有8种,且耐药基因盒与PA耐药性有较好的一致性;2.Ⅰ类整合子阳性PA对各类抗菌药物耐药率均高于Ⅰ类整合子阴性菌株,其差异除氯霉素外均有统计学意义(P<0.01);3.亚抑菌浓度(4 mg/ml)的山银花粗提物对绿脓素及弹性蛋白酶的表达有显著的抑制作用(P<0.0 5),山银花粗提物在MIC时对鼠李糖脂有显著抑制作用(P<0.0 1);4.实时荧光定量PCR检测结果显示山银花粗提物在亚抑菌浓度(4 mg/ml)时,rhl I和las I基因的表达量显著低于空白对照组(P<0.0 1);在MI C时对rh l R基因的表达有显著的抑制作用(P<0.01)。结论:1.该医院Ⅰ类整合子-基因盒体系是介导PA耐药的重要因素之一;2.首次证实山银花粗提物对Ⅰ类整合子阳性株的抑菌效果强于Ⅰ类整合子阴性株;3.湖南隆回山银花(灰毡毛忍冬)粗提物能够抑制毒力因子及群体感应基因的表达,其抑制机制与QS系统调控有关。