N,O-羧甲基壳聚糖复合羟基磷灰石修复兔下颌骨骨缺损的实验研究

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目的 甲壳素水溶性衍生物N,O-羧甲基壳聚糖(N,O-carboxymethyl chitosanN,O-CMCS)复合羟基磷灰石颗粒(hydroxyapatite HAp)制备出可塑性的骨修复材料用于兔下颌骨骨缺损的修复,观察评价材料的生物活性和成骨特性,探讨材料的优化机制,为用于骨修复和组织工程支架材料提供试验依据,初步评价新型材料的应用前景。方法1.材料制备:按不同的比例制备N,O-CMCS/HAp复合物,其比例分别为2:1,1:1,1:2(w/v),然后按粉、液比约1/1(w/v)的比例添加无菌蒸馏水调制成具有良好可塑性的复合材料。对复合材料的生物学性状进行初步评价,计算孔隙率,观察孔径大小和材料间的交连特点。2.动物实验:36只健康成年新西兰白兔,首先将实验动物按照术后处死时间随机分成4个时间组(9只/组),再将每时间组实验动物左、右侧下颌骨(18侧)随机分为6组(3侧/组),即各材料组及空白对照组:A组,N,O-CMCS组3×4侧;B组,HAp组3×4侧;C组,N,O-CMCS/HAp组(2:1 w/w)3×4侧:D组,N,O-CMCS/HAp组(1:1 w/w)3×4侧;E组,N,O-CMCS/HAp组(1:2 w/w)3×4侧;F组,空白对照组3×4侧。各组动物分别于下颌骨体部制造出约1.2×1.0cm的节段型骨缺损,A组植入N,O-CMCS胶体,B组植入HAp糊剂,C、D、E组分别植入不同含量配比的复合材料,F组空白,定期行X射线观察。分别于术后2、4、8、12周,随机处死1组时间组(9只/组)实验动物。动物处死后立即于骨缺损部位取材,做大体形态观察和组织学观察,扫描电镜观察。结果单纯N,O-CMCS组可见少量诱导成骨现象,但成骨作用不明显,并见大量纤维组织修复。单纯HAp组材料大部分崩解移位,无明显成骨,1例标本伴有感染发生。N,O-CMCS/HAp组成骨效果较明显,而且在新骨形成过程中伴有血管的长入。在三组不同含量复合材料中,随着N,O-CMCS含量的增加,成骨的质量有所下降,新骨的机械强度和硬度不足;随着HAp比例的增加,材料的成骨速度增加并表现出更好的成骨质量。结论N,O-CMCS有良好的水溶性,能有效的络合钙离子与HAp之间形成螯合物,具备良好的生物相容性和可降解性,并有一定的骨诱导能力,较好的骨引导、骨传导能力,是一种有应用前景的骨替代品和骨组织工程支架基质材料。N,O-CMCS/HAp复合物可塑性好,自然生成高孔隙结构,且孔径适于骨细胞的生长和繁殖,材料植入实验动物体内成骨研究表明,材料具有促进成骨细胞和骨细胞黏附、生长和增值的特性,同时,在材料成骨过程中表现出良好的血管化,为新骨的生成和保持稳定提供了条件。实验中对不同配比材料的研究说明,当复合材料接近正常第1章论文骨的无机、有机比例时,材料表现出更好的成骨特性。N,O一CMCS、HAp制备、保存简单,具有良好的生物学特性,二者复合后表现出良好的成骨活性,是一种有应用前景的骨修复材料,具有推广价值。
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