亚甲基蓝、亮绿及其代谢物均属于染料类化合物,亚甲基蓝（Methylene blue,MB）属于噻嗪类染料,亮绿（Brilliant green,BG）属于三苯甲烷类染料,其结构与孔雀石绿相似。两者均可在水产养殖中用于治疗鱼类疾病。而高浓度的亚甲基蓝和亮绿具有一定的毒性,会对水生生物造成危害,并通过食物链影响人类健康。目前缺乏这些化合物同时检测的定性定量方法,并且对于在生物体内的代谢情况不甚了解。本文采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）,建立了水产品中亚甲基蓝、亮绿及其代谢物残留的检测方法,同时研究了亮绿在鲫鱼体内的代谢消除规律,取得如下主要研究成果:（1）建立了水产品中亚甲基蓝、亮绿及其代谢物残留量同时测定的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法。样品经盐酸羟胺溶液、对甲苯磺酸溶液、柠檬酸磷酸盐缓冲溶液和乙腈提取,乙腈饱和的正己烷去脂,二氯甲烷液液萃取,酸性氧化铝固相萃取柱净化,氮吹浓缩,定容后测定。以2 mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸）、乙腈（含0.1%甲酸）和甲醇为流动相,CAPCELL PAK C₁₈色谱柱进行分离,在选择反应离子监测（SRM）模式下测定,外标法定量。在最佳实验条件下,5种化合物在1.0¹00μg/kg范围内线性关系良好（R²>0.991）,检出限（LOD,S/N≥3）均为1.0μg/kg,定量限（LOQ,S/N≥10）均为3.0μg/kg;在水产品中加标水平为3.0、10.0、25.0μg/kg时,亚甲基蓝、亮绿、天青A和天青B的加标回收率为70.0%¹10%,天青C的加标回收率为60.0%¹00%,批内相对标准偏差≤15%,批间相对偏差≤15%。该方法灵敏度高、准确性好,能有效检测水产品中亚甲基蓝、亮绿及其代谢物的残留量。（2）亮绿在鲫鱼体内的代谢消除规律的研究。本实验用浓度为200 ng/mL的亮绿溶液在水温18²2℃的条件下,对鲫鱼浸泡2 h后转移至清水中,在药浴结束后对亮绿在鲫鱼组织中的药代动力学特征和代谢消除规律进行研究。采用液相色谱-串联质谱法对亮绿在鲫鱼不同组织肌肉、肝脏、肾脏和血液中的浓度进行测定,并利用DAS 3.0.5药代软件进行数据处理,对药代结果采用非房室模型参数进行分析。本研究中隐色亮绿标准溶液和药浴后0 h和4 h肌肉中隐色亮绿的色谱时间一致且质谱中特征离子碎片的相对丰度符合相关规定中的定性要求,说明隐色亮绿是亮绿在鲫鱼体内会产生代谢产物。此外,也发现亮绿在鲫鱼体内能够很好的吸收、渗透和分布;在肝脏和肾脏中的含量较高,浓度含量为270.9μg/kg和262.5μg/kg,表明亮绿更易蓄积在肝脏和肾脏中;亮绿在血液中的消除半衰期最小,为23.3 h,并且血液中的总体清除率要高于其它三个组织,表明亮绿在血液中更易消除。隐色亮绿在肝脏和肾脏中蓄积含量最高,而血液中最低,且在药浴结束后48 h时血液中未检出,肝脏在40 d时未检出,而在40 d时肌肉和肾脏中的含量分别为6.7μg/kg、21.7μg/kg,表明其在肾脏中更不易消除;隐色亮绿在各组织中的分布数据虽然总体呈下降趋势,但出现多峰现象,可能是隐色亮绿在鱼体内代谢产生后,又重新在一些组织中进行了分布和蓄积。该研究初步探讨了亮绿和隐色亮绿在鲫鱼体内的代谢特征,也可为渔业养殖监管部门更好地指导和监管养殖户用药提供理论依据和数据支撑。