核因子-κB/环氧合酶-2与新生鼠坏死性肠炎相关性研究

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目的 探讨核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)/环氧合酶-2蛋白(cyxlooxygenase-2,COX-2)信号途径与新生鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis.NEC)发病的关系及影响,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据。 方法 制备NEC早期动物模型,将1日龄新生Wistar大鼠放入100%氮气中窒息7min,再放入100%氧气中7min,与母鼠同笼饲养,①用流式细胞术(Flow Cytometer,FCM)检测核转录因子-κB在不同时相点(1.5,3,4,5.5,7,24h)NEC及正常鼠肠组织中的表达(各5只);②用免疫组化方法检测正常和病变鼠不同时相点(1,3,4,6,7d)肠组织中COX-2蛋白的表达(各5只);③检测抗氧化剂-吡咯二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对NEC鼠肠道NF-κB表达的影响:④观察抗氧化剂-吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)对NEC鼠肠道COX-2表达的影响。 结果 ①正常肠组织中存在少量NF-κB;NEC模型中,不同时相点均升高,1.5h开始上升、4h达高峰、后渐下降、7h下降至1.5h水平、24h恢复至正常水平;应用抗氧化剂PDTC(200mg/kg)后肠组织NF-κB的表达降低。②COX-2蛋白在正常新生鼠肠组织中呈低强度表达;在NEC病变肠组织中表达强度明显增高,且不同时相点表达不同,1天表达增加,4天达高峰,后渐下降,7天时下降至1天时水平;应用抗氧化剂PDTC(200mg/kg)后肠组织COX-2的表达降低;肠组织病理损伤减轻。 结论 新生鼠坏死性小肠结肠炎时NF-κB及环氧合酶-2的表达增强,均有一高峰期;抗氧化剂PDTC对NEC时新生鼠肠组织NF-κB及环氧合酶-2的表达有所抑制,提示核转录因子-κB/环氧合酶-2蛋白径路与NEC的发病密切相关。
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