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目的:新生儿窒息及窒息后所导致的缺氧缺血性脑病(Hypoxic ischemic encephalopathy, HIE)是造成新生儿死亡和儿童神经系统功能障碍的常见疾病,国内报道新生儿窒息总的发病率约为7%～10%。检测脑组织损伤后的特异生化指标的改变,对评估窒息后脑损伤的程度有着重要的临床意义。脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor, BDNF)广泛分布于中枢神经系统,对神经元损伤的修复和再生起着重要作用。动物实验已证实,在脑缺氧缺血后BDNF表达显著增加。S100B蛋白是S100蛋白家族中在中枢神经系统表达的活性形式,具有脑组织特异性,脑组织损伤后,S100B蛋白通过受损的血脑屏障进入血液导致血清S100B蛋白升高。研究发现,脑缺血后Tau蛋白表达增加,推测Tau蛋白有可能是预示脑缺血早期的敏感指标。但目前国内对足月儿窒息后上述生化指标的动态研究报道较少。本研究目的旨在通过动态监测足月窒息新生儿血清BDNF、S100B、Tau蛋白含量及变化情况,了解其与新生儿HIE早期诊断及病情程度判断的关系,为早期干预治疗HIE,降低新生儿死亡率及致残率提供临床依据。方法:1选择病例选取2009年06月至2010年06月入住白求恩国际和平医院新生儿科的窒息新生儿共30例作为窒息组,对照组为同期入住我院母婴同室无宫内窘迫的正常新生儿20例。纳入研究前告知患儿法定代理人并征得其同意。1.1窒息组凡胎龄≥37周,出生体重≥2500g,满足以下其二即可:1) 1minApgar评分0～3分或5min≤5分;2)生后动脉血气pH<7.0,同时BE≤-10mmol/L;3)因围产期窒息(呼吸困难、皮肤青紫、低氧血症)等原因造成的低血压(需生理盐水扩容),严重呼吸暂停、少尿。剔除标准:先天性畸形、染色体疾病、先天代谢异常、先天性心脏病、家族遗传性血液病、糖尿病母亲、败血症、多胞胎及母亲孕期患有脓毒血症。对照组包括20例足月健康无窒息迹象的适于胎龄儿,孕周和性别与窒息组无差异,动脉血pH>7.2,1分钟、5分钟阿氏评分均>7分。1.2临床观察指标:性别、胎龄、出生体重、分娩方式,临床表现,生后7日行新生儿神经行为评分、颅脑彩超、头颅CT扫描。2标本检测2.1标本采集入选窒息患儿均于生后24时、72时、7天采取桡动脉血2ml,于干燥促凝管中,凝血后以3000r/min离心5min,取血清分装于2-3个500ul管中保存,-70℃冰箱保存待检,对照组取生后24小时内动脉血保存待检。2.2检测方法应用ELISA法严格按照试剂盒说明进行操作,采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定,BDNF、S-100B蛋白及Tau蛋白试剂盒分别由美国RD公司、GBD公司,上海玉博生物科技有限公司提供。2.3统计方法采用SPSS13.0统计学软件进行统计学处理,计量资料服从正态分布和方差齐性的资料,采用均数±标准差(x±s)表示,两样本均数比较的t检验,各项指标的变化采用重复测量设计方差分析;计量资料呈非正态分布、方差不齐者采用两样本非参数的秩和检验;计数资料组间比较采用卡方检验。检验水准定为0.05, P值小于0.05有统计学意义,P值小于0.01有显著差异。结果:1窒息组与对照组两组患儿在孕周、出生体重、分娩方式及性别分布上差异无显著性。2本研究发现:2.1正常新生儿生后24h内血清BDNF浓度为713.01±259.40 pg/ml,S100B蛋白含量为1.44±0.21μg/L, Tau蛋白为1.11±0.46ng/ml。窒息组生后24h内血清BDNF、S100B、Tau蛋白浓度分别为:1211.02±480.00 pg/ml,1.85±0.70μg/L,1.11±0.46pg/L;与对照组比较,生后24小时内血清BDNF浓度较对照组明显升高(P<0.01),窒息组S100B、Tau蛋白与对照组相比未达到统计学差异(P>0.05)。2.2窒息组动态改变结论:监测血清BDNF,观察发现生后24小时升高,第3日轻度下降,生后7日再次升高,但各时间点差异无统计学意义(P>0.05);动态监测血清S100B蛋白水平,生后7日内呈进行性升高趋势,具有统计学意义(P<0.05)。动态监测血清Tau蛋白水平,各时间点差异无统计学意义(P>0.05)。2.3生后24小时、72小时窒息患儿血清BDNF浓度、S100B蛋白浓度无明显升高,生后第7日时,中重度HIE(n=11)患儿血清BDNF浓度、S-100B蛋白浓度较轻度HIE患儿(n=17)明显增高(P<0.05)。结论:新生儿窒息后血清BDNF浓度于生后24小时内明显升高,动态检测血清S100B蛋白浓度,该因子在生后7日内呈进行性升高趋势,中重度HIE患儿血清BDNF、S100B蛋白于生后7日明显增高,二者具有一定的协同作用。通过本实验可以得出结论:血清BDNF、S100B蛋白水平联合应用可能对早期诊断窒息后脑损伤、判断脑损伤严重程度、评估预后有着重要的临床意义。