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本研究的内容主要分成两部分:
第一部分:乙醚部位、正丁醇部位和水部位的提取分离与结构鉴定。采用95%乙醇提取,系统溶剂萃取,得乙醚部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位。将乙醚部位萃取液浓缩后以柱层析硅胶拌样,然后取适量上硅胶柱,经反复硅胶柱层析及制备薄层层析,结果共分离得到3个化合物。水部位和正丁醇部位分别进行DiaionHP-20、ToyopearlHW-40、SephadexLH-20、硅胶等柱层析及制备薄层层析,结果共分离得到4个化合物,根据化合物的理化性质及UV、1HNMR、13CNMR、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC等波谱分析方法,鉴定了7个化合物的结构,其中两个化合物的结构相同,它们分别为:正二十八烷(octacosane,GS-M-01)、角鲨烯(Squlene,GS-M-02)、二十八烷-1-醇(1-octacosanol,GS-M-03)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(apigen-7-O-β-D-pyranglycuronide,GS-Z-01、GS-S-01)、牡荆素(vitexin,GS-Z-02)、5,7,3’,4’-四羟基-6-C-β-D-葡萄糖黄酮碳苷[5,7,3’,4’-tetrahydroxyl-6-C-β-D-glucopyranosylflavone,该化合物又名异荭草素(isoorientin,GS-Z-04)]和5,7,4’-三羟基-6-C-β-D-葡萄糖黄酮碳苷,该化合物又名异牡荆苷或异牡荆素(isovitexin,GS-Z-04)。以上化合物均是首次从构树叶中分离得到的。
第二部分:构树叶质量标准的研究。
一、对构树叶的植物形态及其性状进行观测,并描述其生药学特征,对叶的横切面、粉末显微特征也进行观测描述,并绘出了叶的显微详图及粉末显微特征图。同时对构叶的理化鉴别方法中的薄层鉴别以及水分、灰分浸出物等进行了研究。
二、构树叶中牡荆素、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的含量测定。采用高效液相色谱法对构树叶中牡荆素、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的含量测定方法进行了初步的探讨,为建立其质量标准提供了参考依据。色谱柱采用SHIM-PACKPV-ODS柱,测定牡荆素是在流动相为甲醇-1%乙酸(30∶70),检测波长为359nm,柱温:28℃条件下进行的,在0.05~0.4μg范围内线性关系较好,相关系数r=0.9992:平均回收率为99.2%,RSD为1.42%。测定芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷是在流动相为甲醇-0.05%磷酸(40∶60),检测波长324nm,柱温:25℃条件下进行的,在1.81~4.07μg范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998。平均回收率为100.9%,RSD为1.58%。