甲状腺素对大鼠解偶联蛋白-2基因表达的影响

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目的 通过检测大鼠骨骼肌组织(skeleton muscle SM)、肝组织(liver LV)和白色脂肪组织(white adipose tissue WAT)中解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2 UCP<,2>)在不同甲状腺功能状态下基因表达的变化,探讨甲状腺素对UCP<,2>基因表达的影响.方法 1、动物模型的建立:正常雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组,对照组、甲状腺功能亢进(甲亢)组和甲状腺功能低下(甲低)组,每组10只,甲亢组和甲低组分别应用左旋甲状腺素钠片330μg/kg/d和甲巯咪唑片25mg/kg/d溶解于2mL生理盐水中灌胃,共10天,造成大鼠甲亢和甲低状态.在预定时间处死大鼠,从心脏取血2ml,分离血清;取腓肠肌组织(SM)、肝组织(LV)和附睾旁WAT约100mg,冷藏备用.2、用放射免疫法检测血清总T<,3>、T<,4>的浓度,确定模型是否成功.3、用TRIzol等试剂提取组织中总RNA,测定总RNA的浓度.4、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法对UCP<,2> mRNA进行扩增,产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后,应用凝胶成像分析系统成像并检测各电泳条带光密度,结果以UCP2/β-actin光密度比值表示.结论 生理水平的甲状腺素是UCP<,2>的表达所必需的,过量甲状腺素对大鼠SM、LV和WAT中UCP<,2>基因的表达具有上调作用,甲状腺素水平过低则下调大鼠SM、LV和WAT中UCP<,2>基因的表达.
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