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来源于家蚕蚕丝的丝素蛋白材料具有良好的生物相容性和生物可降解性以及可调控的二级结构,在组织修复、药物缓释和生物传感器等领域应用广泛。具有柔软多孔特性的丝素蛋白膜可以为细胞生长提供所需营养运输的通道和稳定的载体支架,用于人造血管、皮肤、角膜等软组织的修复。但是在膜中提高孔径和孔隙度会影响膜的拉伸性能。研究发现丝素蛋白的结构可以通过多种物理和化学方法进行调控,进而达到增高材料拉伸性能(柔软性、刚性、弹性等)的目的。本研究是在以往丝素蛋白/甘油共混膜的研究基础上,对丝素蛋白膜的孔隙度和孔径大小进行调控,同时增大膜的柔韧性,使其可以更好地应用于组织再生修复。本研究中,在丝素蛋白中混入聚乙二醇400和甘油,在成膜的过程中控制环境温度和湿度来制备柔软复合膜(SPG)。表征了复合膜的二级结构,表面形貌,拉伸性能,热稳定性以及成纤维细胞(HS865.SK)在细胞膜上生长情况,发现复合膜具有优异的柔韧性。当丝素蛋白/聚乙二醇/甘油的重量比为10/5/3的时候,膜的弹性模量和断裂伸长率分别达到0.13±0.02 MPa和164.24±24.20%,显著优于纯丝素蛋白膜(应力值4.57±0.5MPa,应变值3.84±0.46%)和丝素/甘油复合膜(应力值0.87±0.06MPa,应变值119.73±33.02%)。SPG复合膜在水中保持稳定,结构以Silk I(ɑ-螺旋)为主,随着膜干燥过程中湿度(达到80%)和温度(4℃到60℃)的升高,复合膜的二级结构由alpha螺旋向beta-折叠结构转变(beta折叠含量从27.00±1.26%增加到63.63±1.79%),形成Silk II结构。相比其他样品,丝素蛋白/聚乙二醇/甘油的重量比为10/5/3的SPG复合膜具有最佳的通透性,在24h到120h的观测时间内35%的牛血清白蛋白(分子量~66kDa)渗透到膜的另一侧,显著快于纯丝素膜和丝素/甘油膜(仅10%通过)。通过扫描电镜观察膜中孔径大小和密度,结果与通透性实验一致。结果说明复合膜制备中混入的PEG400即可作为致孔剂增大膜的孔隙率,也可以与甘油共同作用调节丝素蛋白二级结构含量,进而调节膜的机械性能。进一步的体外细胞培养实验证明SPG复合膜可以很好地支持成纤维细胞(HS865.SK)在膜上生长,具有理想的生物相容性。