绿潮相关绿藻的细胞与分子鉴定

来源 :苏州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:JessicaGu45
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
绿潮(green tides)通常指的是在特定的环境条件下,由于海水中某些大型海洋绿藻的过度增殖和聚集而形成的一种生态灾害。自2007年以来,绿潮均于每年的5-7月份在我国黄海海域周期性大规模爆发,严重影响到了周边养殖和旅游业,带来了严重的生态危害和经济损失。浒苔(Ulvaprolifera)是一种常见的大型海洋绿藻,隶属绿藻门(Chlorophyta)、绿藻纲(Chlorophyceae)、石莼目(Ulvales)、石莼属(Ulva)。其已被证实为黄海绿潮优势的物种。浒苔藻体亮绿或暗绿,外形充气时呈管状,有明显的主枝和细密的多级分枝,生长在海洋沿岸中低潮区的砂砾、岩石、滩涂和石沼中。浒苔的同型世代交替及其对盐度、温度、光照和干出条件的适应性,使其成为绿潮爆发的主要物种,同时也是筏架区人工养殖条斑紫菜的主要生态位竞争者之一。本研究在江苏紫菜筏架、山东沿海海域不同的位点采集绿藻样品,结合目前所涉及到的多种常用鉴定绿藻种类的分子标记,对不同位点采集到的绿藻样品种类进行分子鉴定,并筛选出合适的分子标记组合以便于后续的物种鉴定;针对ISSR通用引物筛选开发出了一对可以快速鉴定漂浮浒苔的引物;另外,还通过流式细胞与染色体观察结合的方式对黄海绿潮浒苔进行了倍性鉴定,并对流式细胞上样体系中原生质体的制备、裂解液的选择等步骤进行了优化;最后结合放散趋光性实验对漂浮浒苔的繁殖方式进行了讨论。通过对不同分子标记的筛选,本研究发现ITS对于种间的分子鉴定具有高度保守型,从而可以区分不同的石莼属物种,但无法区别出浒苔(U.prolifera)与缘管浒苔(U.linza);5S间隔区能够有效地区分出LPP复合体中的Ulva prolifera-linza;而18S手段由于过度保守的原因在种间物种鉴定方面展现出许多不足,如扩增测序后构建系统发育树显示无法将较近物种聚类到不同分枝等。另外,本研究还发现tufA基因具有很好的种间鉴定作用,筛选结果显示tufA基因与5S rDNA间隔区的组合可以有效的对不同的绿藻物种进行鉴定。与此同时,本研究还针对绿潮浒苔进行ISSR-PCR多态性条带筛选并据此特异性条带设计了1对有效的分子引物,这种分子引物可直接通过观察目的条带的有无而不经过测序就能进行是否是漂浮浒苔的物种鉴定,大大节约了分子鉴定的时间。通过筛选出的分子标记组合对江苏、山东等地不同定生绿潮种的分布进行了鉴定:山东沿海海域常年可以采集到扁浒苔(Ulva compressa)、肠浒苔(Ulva intestinalis)和孔石莼(Ulvapertusa),在江苏紫菜筏架常年伴生的有浒苔、肠浒苔、缘管浒苔(Ulvalinza)、曲浒苔(Ulvaflexuosa)、以及盘苔(Blidingia minima)等。通过流式细胞术和染色体观察技术结合对黄海绿潮漂浮浒苔的倍性进行探究。流式细胞术获得的结果表明在不同位点采集的样品总体是孢子体占优势,只有极少数是配子体,同时还存在两世代共存的现象,染色体数据也进一步证实了我们的结论:黄海绿潮浒苔在爆发期间是孢子体是占主要优势,检测到少量配子体可能是因为部分藻体进行了减数分裂。同时检测到多世代共存的原因可能是在样品处理时没有保证样品是完全的单株。我们还对黄海绿潮浒苔进行了放散趋光性实验,发现浒苔放散的配子量远大于孢子量,这说明有性生殖是绿潮浒苔繁殖的主要方式。本研究通过从细胞与分子两个方面对黄海绿潮相关绿藻进行研究,前者为绿潮漂浮浒苔的倍性研究提供了证据;后者根据不同分子标记的筛选有助于后续对于石莼属不同物种的快速鉴定。
其他文献
人工林对木材生产、净化环境、调节气候等方面有重要影响。我国人工林面积较大,但存在结构不合理、质量不高等问题。因此如何科学合理地经营管理人工林,实现人工林的可持续发
随着我国矿山生态文明的建设,要求企业进行绿色发展及产业转型。然而,在金属矿山的铁矿石破碎各流程中,存在着能耗巨大的问题,严重阻碍了矿山的转型升级。通过对不同工况下的磁铁矿石试件,进行落锤冲击破碎试验,系统地研究了矿石的耗能规律及破坏机理,主要研究成果如下:1)当层理结构面矿石的倾角为60°时,其实际破坏角与Coulomb准则剪切角基本重合,矿石呈沿层理面的剪切滑移破坏,动态强度最小、吸收能最低;在
目的:对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)感染与颈动脉内-中膜厚度(Carotid Intima-media Thcikness,CIMT)的相关性进行 Meta 分析,获得循证医学证据。对滨州医学院附属医
机械加工零件时,零件表面质量,比如如平面度,不仅与加工方法及工艺参数有关,也与加工刀具的磨损程度紧密相关,保证机床加工时刀具的良好状态非常必要。本文从刀具状态监控的
近年来,随着经济粗放发展带来的环保问题日益显著,政府和社会对环保行业的关注度逐渐提升,环保行业得到迅速发展。在政府环保监管逐渐严格、市场对环保综合能力要求不断提高
复合胶束药物载体可以提高药物的生物利用度,降低药物毒副作用,实现药物的可控释放。本文设计合成了两种基于动态酸敏感亚胺键连接的具有聚乙二醇单甲醚(MPEG)和聚N-乙烯基己内酰胺(PNVCL)混合壳层的复合胶束,研究了其对阿霉素(DOX)的包封、释放和细胞毒性等性质。MPEG具有良好的亲水性和生物相容性,可以避免其在血液循环过程中被蛋白吞噬,提高药物到达病灶的机会。温度响应性链段PNVCL在伸展状态
土壤是人类生存的物质基础,也是人类宝贵的财富源泉。而解决土壤研究中遇到的复杂问题,首要要正确的认识和了解土壤,即对土壤进行统一的分类命名。现如今土壤系统分类是国际
研究蒸散发变化规律及驱动因素,并提高蒸散发估算精度,对探明干旱半干旱地区水文循环规律具有重要意义。本文以科尔沁沙地典型地貌类型—草甸、半流动沙丘、半固定沙丘、玉米
本实验将筛选出具有优良特性的乳酸菌和商业发酵剂302作为发酵剂进行发酵羊肉干的制作,以自然发酵为对照,通过电子舌、气相质谱联用和PCR-DGGE等技术,测定发酵羊肉干感官品质、滋气味和菌群结构变化,并分析不同发酵剂对发酵羊肉干风味和菌群结构的影响,以期为优良发酵剂的筛选提供理论依据。研究结果如下:通过对从3种传统发酵肉制品中分离出的46株乳酸菌进行耐盐、耐亚硝酸盐、耐酸等特性进行的分析,最终选择T
随着地膜覆盖技术的推广,特别是膜下滴灌技术的大规模实施,实现了节水、保墒、增温、增产的效果,也促进了农业的增产,然而由于农膜回收机制的不健全,多年覆膜连作导致大量的