大鼠原发性肝癌形成过程中CYP450、GST的变化及CYP2D家族基因的表达情况

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用DAB作为诱变剂致大鼠原发性肝癌,研究在肝脏癌前期病变及形成肝癌的过程中CYP2D的mRNA、CYP450含量、氨基比林-N-去甲基化酶及GST活性的变化,以确定其变化趋势和规律。用RT-PCR方法研究大鼠的CYP2D基因的四个亚型(CYP2D1,CYP2D2,CYP2D3和CYP2D4)的mRNA在肝脏及CYP2D1在大脑的表达情况,以经典药理学方法研究CYP450含量、氨基比林-N-去甲基化酶及GST活性。结果表明,CYP450含量及GST、氨基比林-N-去甲基化酶的活性在2周时无显著性差异(与对照组相比);CYP450含量及氨基比林-N-去甲基化酶的活性在第12、30周时明显降低,GST在12周时明显增高,而在30周时与对照组无差别;在形成肝癌的大鼠肝脏中,肝组织中的CYP45O含量水平依次是:癌组织<癌旁组织<正常组织;CYP2D1、CYP2D2和CYP2D4的mRNA在肝癌组织和正常组织中均有表达,而CYP2D3却无表达;CYP2D1PCR产物经电泳后,肝癌组织的条带密度明显弱于正常组织的条带密度,对CYP2D1、CYP2D2和CYP2D4的肝癌组织和正常组织的PCR产物进行核苷酸测序,分析显示CYP2D1和CYP2D4存在碱基突变;在对照组和实验组中,CYP2D1的mRNA在脑组织中都有表达。以上研究结果提示DAB不同程度地降低CYP450的含量及氨基比林-N-去甲基化酶活性;在肝癌组织中,CYP2D1 mRNA的表达也降低。对CYP2D1 mRNA在大脑的表达水平的进一步研究,将有利于阐明其在中枢神经系统的生理学、药理学作用。
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