【摘 要】
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目的 建立兔髁突骨软骨联合缺损动物模型,分析Histatin 1（Hst 1）水凝胶聚合体对骨软骨缺损区修复的影响与作用机制,探讨Hst 1水凝胶聚合体在颞下颌关节软骨组织工程中的应用价值。方法 1.将6只成年雄性新西兰白兔随机分为3组,每组2只兔子。分别在三组兔子右侧髁突前斜面上制备不同大小的缺损,左侧髁突保持完整。3×3组缺损直径为3mm,深度为3mm;3×2组缺损直径为3mm,深度2mm;2
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目的 建立兔髁突骨软骨联合缺损动物模型,分析Histatin 1（Hst 1）水凝胶聚合体对骨软骨缺损区修复的影响与作用机制,探讨Hst 1水凝胶聚合体在颞下颌关节软骨组织工程中的应用价值。方法 1.将6只成年雄性新西兰白兔随机分为3组,每组2只兔子。分别在三组兔子右侧髁突前斜面上制备不同大小的缺损,左侧髁突保持完整。3×3组缺损直径为3mm,深度为3mm;3×2组缺损直径为3mm,深度2mm;2×3组缺损直径为2mm,深度3mm。术后4周取材,制作HE切片并在光镜下观察。2.将6只成年雄性新西兰白兔随机分为3组,每组2只。在兔子的右侧髁突制造直径为3mm,深度为3mm的骨软骨联合缺损,左侧保持完整。50μg Hst 1/Gel-MA 组、500μg Hst 1/Gel-MA 组和 1000μg Hst 1/Gel-MA组缺损区内分别植入50、500、1000μg Hst 1+21μl Gel-MA水凝胶,术后2周取材并进行组织学检测。3.将54只成年雄性新西兰白兔随机分为3组,每组18只兔子。在兔子的右侧髁突制造直径为3mm,深度为3mm的骨软骨联合缺损,左侧髁突则保持完整。对照组缺损区不接受任何治疗;Gel-MA组中缺损区植入Gel-MA水凝胶;Hst 1/Gel-MA组中在缺损区植入Hst 1+Gel-MA水凝胶聚合体。分别于术后第1、2、4周在三组中各随机选取6只兔子处死,对缺损区及周围组织进行取材,进行扫描电镜、天狼星红染色及免疫组化检测。结果 1.术后4周,HE染色显示,3×3组中仅在缺损区底部有少量纤维组织生成;3×2组中观察到缺损区有大量软骨下骨修复,缺损区深度减小;2×3组中软骨下骨基本修复完成,上部覆盖纤维组织。2.术后2周,由HE染色可知,50μg Hst 1/Gel-MA组内缺损区无修复组织生成;500μg Hst 1/Gel-MA组缺损区内可见多个新生软骨岛,新生软骨下骨中观察到成骨细胞与破骨细胞存在;1000μg Hst 1/Gel-MA组中软骨下骨过度增殖,无软骨修复。3.第4周时,相较于Gel-MA组和对照组,Hst 1/Gel-MA组中电镜下观察到新生软骨细胞数目更多;天狼星红染色显示富含Ⅱ型胶原纤维（COL Ⅱ）,呈疏松网状分布;免疫组化显示细胞外基质中,Hst 1/Gel-MA组COL Ⅱ和Aggrecan（AGC）的IOD均值分别为173.16±26.03和61.54±1 1.87,显著高于其余两组（P<0.001）。结论 1.直径3mm,深度3mm的缺损大小为合适的兔髁突骨软骨联合缺损建模尺寸。2.Hst 1水凝胶聚合体的配比为500μg Hst1+21μlGel-MA时,缺损模型中软骨及软骨下骨有良好的修复迹象。3.Hst 1 水凝胶聚合体通过促进细胞外基质COL Ⅱ及AGC的分泌,从而促进髁突软骨的再生。临床上可应用Hst 1水凝胶聚合体修复关节骨软骨联合损伤。
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