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目的研究针对VEGF的小分子干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰(RNAi)技术对人子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及蛋白的靶向抑制作用,观察对细胞增殖的影响及形态的变化,探讨针对VEGF的siRNA介导RNAi技术的在子宫内膜癌基因治疗的应用前景。方法根据siRNA序列设计原则,设计并合成针对VEGF-165序列特异性小干扰RNA(siRNA)及阴性对照siRNA,应用德国QIAGEN公司RNAiFectTMTransfection试剂盒转染ishikawa细胞,分别于转染后12h、24h、48h、72h、7d后提取细胞RNA,应用实时荧光定量PCR检测其对VEGF mRNA表达水平的影响,Western Blot方法检测VEGF蛋白的表达水平,MTT法及细胞计数法检测细胞增殖的情况。结果(1)实验组的细胞明显变形、皱缩、变圆并开始脱落,内见凋亡小体。(2)荧光定量PCR检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF mRNA表达水平明显下降,与对照组相比差异有统计学意义(Q值依次为6.44、8.75、19.23、7.34,P均<0.05),于转染后7天这种抑制作用消失(F=4.26,P>0.05);(3) Western Blot方法检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF蛋白表达明显减弱(F值依次为19.7、79.6、203.1、58.2,P均<0.05),与对照组相比差异有统计学意义,于转染后7天这种抑制作用消失(F=3.2,P>0.05);(4) MTT法检测发现转染后12h-72h,实验组细胞增殖抑制率与相同时间点各对照组相比明显增高,差别有统计学意义(F值依次为20.4、25.1、40.6、23.4,P均<0.05),转染后7天这种抑制作用消失,差别无统计学意义(F=9.1,P>0.05);(5)细胞计数法发现转染后12h-7d,实验组细胞数均明显低于相同时间点各对组(F值依次为4.23、6.86、7.12、12.1,P均<0.05)。结论针对VEGF的RNAi技术可有效抑制子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及其蛋白的的表达,抑制细胞的生长增殖,且VEGF的表达的变化趋势与细胞增殖变化趋势一致,提示VEGF在子宫内膜癌的发生、发展中具有重要作用,针对VEGF的RNA干扰技术为子宫内膜癌基因治疗提供了新策略,为进一步利用RNAi技术抑制肿瘤生长、血管形成及局部侵袭和远处转移提供研究基础。