针对VEGF的siRNA对人子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF表达及细胞增殖的影响

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellojie
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的研究针对VEGF的小分子干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰(RNAi)技术对人子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及蛋白的靶向抑制作用,观察对细胞增殖的影响及形态的变化,探讨针对VEGF的siRNA介导RNAi技术的在子宫内膜癌基因治疗的应用前景。方法根据siRNA序列设计原则,设计并合成针对VEGF-165序列特异性小干扰RNA(siRNA)及阴性对照siRNA,应用德国QIAGEN公司RNAiFectTMTransfection试剂盒转染ishikawa细胞,分别于转染后12h、24h、48h、72h、7d后提取细胞RNA,应用实时荧光定量PCR检测其对VEGF mRNA表达水平的影响,Western Blot方法检测VEGF蛋白的表达水平,MTT法及细胞计数法检测细胞增殖的情况。结果(1)实验组的细胞明显变形、皱缩、变圆并开始脱落,内见凋亡小体。(2)荧光定量PCR检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF mRNA表达水平明显下降,与对照组相比差异有统计学意义(Q值依次为6.44、8.75、19.23、7.34,P均<0.05),于转染后7天这种抑制作用消失(F=4.26,P>0.05);(3) Western Blot方法检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF蛋白表达明显减弱(F值依次为19.7、79.6、203.1、58.2,P均<0.05),与对照组相比差异有统计学意义,于转染后7天这种抑制作用消失(F=3.2,P>0.05);(4) MTT法检测发现转染后12h-72h,实验组细胞增殖抑制率与相同时间点各对照组相比明显增高,差别有统计学意义(F值依次为20.4、25.1、40.6、23.4,P均<0.05),转染后7天这种抑制作用消失,差别无统计学意义(F=9.1,P>0.05);(5)细胞计数法发现转染后12h-7d,实验组细胞数均明显低于相同时间点各对组(F值依次为4.23、6.86、7.12、12.1,P均<0.05)。结论针对VEGF的RNAi技术可有效抑制子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及其蛋白的的表达,抑制细胞的生长增殖,且VEGF的表达的变化趋势与细胞增殖变化趋势一致,提示VEGF在子宫内膜癌的发生、发展中具有重要作用,针对VEGF的RNA干扰技术为子宫内膜癌基因治疗提供了新策略,为进一步利用RNAi技术抑制肿瘤生长、血管形成及局部侵袭和远处转移提供研究基础。
其他文献
《中国质量技术监督》2012年第11期刊载了《食品中添加人参是否违法》一文,笔者认为,该案非常具有典型性和代表性,对于该案的探讨有利于执法人员进一步解除办案疑惑,厘清办案思路
孤独在平凡人生中通常只被当做一种无聊沉闷的惯常经验,但在短诗《海子在昌平》里诗人徐鲁却把一种孤独体验推向了地老天荒的境界,并在那种境界中复活了一个执著坚忍的诗性灵
抗体介导的肿瘤靶向治疗已经成为抗肿瘤研究和临床应用的热点之一,但是传统的以抗肿瘤单抗为载体直接偶联效应分子的靶向治疗只能携带一种药物,往往不能达到理想的治疗效果,
人生长抑素受体2亚型(hSSTR2)是生长抑素受体家族中介导生长抑素(SS)作用最重要的亚型,通常分布在正常细胞和神经内分泌肿瘤细胞表面。研究表明乳腺癌细胞膜亦有SSTRs的表达,
<正>"全人课程"三部曲○第一个五年聚焦课程结构拓展型课程研究与实践广东省校本教材一等奖○第二个五年聚焦课程师资教师群体发展实践与研究广东省教学成果二等奖○第三个五
作为一部票房与好评双高的国产影片,《中国合伙人》通过"土"与"洋"两类人物及故事语境的自由转换,美国梦与中国梦的"价值共谋",怀旧与现实的"文化勾兑",在展示中国当代知识精
工学结合是高职教育人才培养的创新模式。本文基于该模式指导,探讨了促进高职数学教学改革的有效策略,以期能促进高职数学教学目标的顺利实现。
简要介绍了太平洋年代际振荡(PDO)的研究历史.在此基础上,选择两个分别来自长江下游和黄河口的钻孔沉积记录,探索百年以来沉积物粒径变化对PDO波动的响应.研究结果表明,来自
"亲爱的"作为称呼语呈现泛化的趋势,是言语交际中说话者为了拉近与听话人之间的距离,表示亲近关系的一种言语行为,试图从历时的角度对称呼语"亲爱的"的来源、泛化和特点等进
【目的】:直肠癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一,淋巴结转移是其最常见的转移方式之一,有无淋巴结转移对直肠癌的分期、治疗及判断预后都有重要的指导意义。因此,关于影响