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目的:通过分析单次化疗前、后肿瘤组织中99Tcm-HL91摄取、HIF-1α表达与细胞凋亡状态的相关性,探讨利用99Tcm-HL91显像早期评价化疗后肿瘤细胞凋亡状态的可行性。
方法:采用99Tcm直接标记HL91作为核素乏氧显像示踪剂。将20只荷乳腺癌Ca761的雌性615小鼠随机分为两组:对照组和化疗组,每组各10只。化疗组小鼠一次性接受多烯紫杉醇(docetaxcel)腹腔内注射,剂量为5mg/kg(0.4mg/1ml);对照组小鼠腹腔注射相同体积的生理盐水。24h后,两组小鼠同时经鼠尾静脉注入37MBq(0.1ml)99Tcm-HL91;对照组分别于注射后1、2、4、6、8h进行全身前后位平面显像,化疗组于注射后4h进行显像。通过感兴趣区技术计算图像上肿瘤组织(T)与对侧相应部位(NT)的放射性比值(T/NT)。显像结束后立即处死全部小鼠,完整切除肿瘤组织,将瘤组织放置于福尔马林液中浸泡、固定,留作原位DNA片段末端标记(TUNEL)法检测肿瘤组织细胞凋亡数及免疫组织化学法检测乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达。
结果:两组小鼠的肿瘤组织对99Tcm-HL91均有较好的摄取和滞留,肿瘤部位与对侧相应部位有较高的放射性计数比。对照组小鼠1、2、4、6、8h的T/NT值分别为1,394±0.074,1.651±0.214,2.310±0.306,1.947±0.250,1.749±0.400;化疗组的T/TN值(4h)为2.018±0.189,两组的T/TN值(4h)具有显著性差异(t=3.199,P=0.024)。对照组的凋亡细胞数、HIF-1α表达(平均光密度值)分别为4.500±0.926,0.010±0.004;化疗组的分别为8.900±2.132,0.005±0.001。两组HIF-1α表达具有显著性差异(t=3.199,P=0.013):两组凋亡细胞数具有显著性差异(t=-5.871,P=0.000)。
相关性研究表明:对照组HIF-1α表达与99Tcm-HL91摄取呈正相关(r=0.856,P=0.007),与凋亡细胞数呈负相关(r=-0.807,P=0.015);99Tcm-HL91摄取与凋亡细胞数无明确相关性(r=-0.572,P=0.138)。化疗组HIF-1α表达与99Tcm-HL91摄取呈正相关(r=0.811,P=0.004),与凋亡细胞数呈负相关(r=-0.916,P=0.000):99Tcm-HL91摄取与凋亡细胞数呈负相关(r=-0.682,P=0.030)。
结论:
1、多烯紫杉醇单次化疗后,不仅可以诱导大量肿瘤细胞凋亡,同时可以降低肿瘤组织内99Tcm-HL91摄取及HIF-1α表达。
2、通过半定量分析99Tcm-HL91在肿瘤组织中的分布可以间接反映肿瘤组织中HIF-1α的表达水平。
3、 HIF-1α高表达可能对肿瘤细胞凋亡有抑制作用。
4、利用99Tcm-HL91显像可以间接评价化疗后早期肿瘤细胞的凋亡状态。