论文部分内容阅读
目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)过表达与结直肠癌患者各临床病理参数及其预后的关系和意义;评价结直肠癌患者k-ras基因突变状态及其临床意义。方法:1.采用EliVisionTM plus免疫组化方法检测1100例结直肠癌组织EGFR蛋白的表达;2.分别应用实时荧光定量PCR和直接测序法检测其中280例结直肠癌组织k-ras基因外显子2中第12、13编码子上最常见的七种突变类型。结果:1. 1100例结直肠癌组织EGFR阳性表达率为24.55%。男性患者阳性表达率明显高于女性(Hc值=5.9091;P=0.015),Ⅳ期、Ⅲ期肿瘤患者阳性表达率明显高于其它各期病例(Hc值=32.6849;P<0.0001),有淋巴结转移者EGFR阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(Hc值=28.2867;P<0.0001),有远处转移者EGFR阳性表达率明显高于无远处转移者(Hc值=152.3555;P<0.0001);EGFR表达与患者年龄、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度等均无明显相关性,其表达水平亦与患者总生存期无明显相关。2.直接基因测序法确认,280例结直肠癌中K-ras基因突变型94例,突变率为33.57%;94例k-ras基因突变病例中,实时荧光定量PCR阳性91例(灵敏度96.8%),阴性3例;186例k-ras基因野生型病例,实时荧光定量PCR阴性184例(特异性98.9%),阳性2例;实时荧光定量PCR法与直接基因测序法符合率为98.2%;k-ras基因突变与患者性别、年龄相关(P<0.05),而与肿瘤部位、分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移无相关性(P>0.05)。结论:结直肠癌患者中存在EGFR蛋白过表达及较大比例的k-ras基因突变。EGFR蛋白检测可以作为评估结直肠癌恶性生物学行为的参考指标。k-ras基因突变虽与结直肠癌的生物学行为无明显相关,但在≥60岁的女性人群中突变率较高;实时荧光定量PCR法与基因测序法符合率为98.2%、两种方法的检测结果高度一致。实时荧光定量PCR能够快速、简便、准确检出结直肠癌K-ras基因突变位点,可用于临床结直肠癌K-ras基因突变的检测。