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用扩增片段为0.2kb、0.6kb、1.7kb的三对引物分别对传染性支气管炎病毒6株标准株：M41、Holte、Arka、Conn、Gray、T和8株地方分离株：宜、138、广32、云、SAIBV14呼、Am、J7、张IBV进行RT-PCR，结果以0.6kb片段引物扩出的毒株最多：6株标准株中的5株：M41、Arka、Conn、Gray、T；8株地方分离株中的6株：广32株、J7株、张IBV株、Am株、宜株、138株。0.2kb片段长度的引物可扩增出2株标准株：M41株和Connecticut株和2株地方分离株：SAIBV14#呼和Am株；而1.7kb长度片段的引物只扩增出了标准株M41和地方分离株138株。取各毒株0.6kb片段PCR产物，分别用三种限制性内切酶AluⅠ、TaqⅠ和AfaⅠ进行酶切，然后根据标准株的酶切模式对各地方分离株进行RFLP分型（AfaⅠ酶切均为阳性），可将参考株分为如下三种模型①M41模式：AluⅠ酶切、TaqⅠ酶切均有特异的条带；②Ark株、G株、C株模式：AluⅠ酶切阳性而TaqⅠ酶切阴性；③T株模式：AluⅠ酶切阴性而TaqⅠ酶切阳性。然后根据标准株的酶切模式对各地方分离株进行RFLP分型，可将各地方分离株分为①M41模式有：广32株、J7株、张IBV株、Am株②Ark株、G株、C株模式有138株、宜株。这表明我国IBV血清型众多，但以M41为代表的呼吸型传支占比例最大（50％），宜株为代表的肾型传支也有一定数量（25％）。将地方分离株宜株的0.6kb片段的扩增产物进行测序并与标准株Ark株、G株、C株和标准株M41的相应序列进行分析比较，认为该地方分离株是以点突变为主并可能伴有基因插入、基因缺失和基因重组的新的IBV变异株，氨基酸同源性的分析显示三株呼吸性毒株M41、H52、H120同源性极高分别为95.8％、97％、98.8％；宜毒株与同一酶切类型的Ark株、G株、 C株的同源性分别为91．6％、SS％、85％，其中与Ark－1529－29株氨基 酸同源性最高，为 gi．6见与不同酶切类型的 M。l、、H。卜 H；。。三毒株氨基 酸同源性较低分别为85．6巩86．2卧86．2趴 因而推测宜株是由 Ark、 《9型株变异而来。本研究对IBV的快速诊断和分型有较大 的实用价值，可为IBV的防制和地方制苗株的选择提供参考依据。