目的:通过模拟中医病因病机（饮食不节+劳倦过度）建立脾气虚证大鼠模型,并设立中药反证组,从行为学、病理学、分子生物学等多系统探讨脾气虚证大鼠复制及评价方案;通过检测各组模型大鼠回肠组织MDA、GSH-Px、5-HT、VIP、呼吸链复合物Ⅰ与Ⅳ、Na⁺-K⁺ATPase、Ca²⁺-Mg²⁺ATPase及cAMP、PKA,从细胞损伤、胃肠肽激素、能量代谢及离子通道多层面探讨脾气虚证现代生物学机制;在中医脾脏象理论指导下,遵“补脾益气法”干预原则,以cAMP、PKA信号通路为核心,从缓解能量代谢异常、抗脂质过氧化损伤及调节胃肠激素分泌多视角阐释“补脾益气方”在改善脾气虚证脾失健运的疗效机制。材料与方法:选用健康SPF级,SD大鼠,以复合因素建立脾气虚证大鼠模型,并以补脾益气方予以反证。评价模型用模糊数学的方法。观察回肠组织黏膜病理形态学改变,用HE染色法。检测回肠组织呼吸链复合物Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺ATPase、Ca²⁺-Mg²⁺ATPase、GSH-Px活性、MDA含量用比色法。检测VIP、5-HT、cAMP、PKA含量及蛋白表达用ELISA法和Western blot法。结果:1.各组大鼠游泳耐力、体重、肛温检测结果与对照组比较,模型组上述检测均显著下降（P<0.01）;与模型组比较,反证组大鼠游泳耐力、体重均上升（P<0.05）、肛温显著上升（P<0.01）。2.HE染色法观察大鼠回肠黏膜病理形态学改变对照组大鼠回肠黏膜结构完整清晰,上皮细胞之间排列紧密且完整;模型组回肠黏膜变薄,绒毛变短或消失,并伴有上皮细胞坏死、脱落,间质血管扩张充血,有炎性细胞浸润;反证组大鼠回肠黏膜较模型组增厚,绒毛增长、上皮细胞排列较一致,坏死、脱落减少,炎性细胞浸润减少。3.比色法检测回肠组织中呼吸链复合物Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺ATPase、Ca²⁺-Mg²⁺ATPase、GSH-Px活性、MDA含量结果与对照组比较,模型组呼吸酶链复合物Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺ATPase、Ca²⁺-Mg²⁺ATPase、GSH-Px活性均显著下降,MDA含量显著上升（P<0.01、P<0.05）;与模型组比较,反证组呼吸链复合物Ⅰ和Ⅳ、Na⁺-K⁺ATPase、Ca²⁺-Mg²⁺ATPase、GSH-Px活性明显提高,MDA含量降低（P<0.01、P<0.05）。4.ELISA法测定回肠组织中VIP、5-HT、cAMP、PKA含量结果与对照组比较,模型组回肠组织中VIP、5-HT含量显著上升（P<0.01）;cAMP、PKA含量显著下降（P<0.01）;与模型组比较,反证组大鼠回肠组织中VIP含量降低（P<0.05）、5-HT显著降低（P<0.01）,cAMP、PKA含量提高（P<0.01）。5.Western blot法检测回肠组织中VIP、5-HT、cAMP、PKA蛋白表达结果与对照组比较,模型组回肠组织中VIP蛋白表达显著上升（P<0.01）、5-HT上升（P<0.05）,而cAMP、PKA蛋白表达均显著下调（P<0.01）;与模型组比较,反证组大鼠回肠组织中VIP、5-HT蛋白表达下调（P<0.05）,cAMP蛋白上调明显（P<0.01）、PKA蛋白表达也上调（P<0.05）。结论:1.回肠黏膜上皮组织结构破坏影响食物消化、营养物质吸收以及转运,是脾气虚证的病理形态学基础之一。2.回肠黏膜损伤,出现机体脂质过氧化增强,线粒体合成能量功能下降,离子转运障碍,信号转导异常,胃肠激素紊乱,是脾失升清与脾运失健的病理机制之一。3.补脾益气法可以恢复回肠黏膜组织形态,恢复细胞正常功能,提高机体抗氧化能力,增加线粒体能量合成,增强离子转运作用,加强环磷酸腺苷调节力,改善胃肠激素分泌情况,是脾气虚证疗效机制之一。