低雄激素状态通过上调大鼠阴茎海绵体组织P2X受体表达抑制其勃起功能

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目的:了解低雄激素状态是否通过P2X受体的表达调控大鼠勃起功能及其机制。方法:将36只8周龄健康雄性SD大鼠随机分成6组:假手术4周对照组、去势(切除大鼠双侧睾丸)4周组、去势+睾酮替代治疗(隔日1次丙酸睾酮3mg/kg皮下注射)4周组、假手术8周组、去势8周组、去势+睾酮替代治疗8周组。测定各组大鼠阴茎最大海绵体内压(ICPmax)/平均动脉压(MAP),检测血清睾酮、阴茎海绵体组织NO含量,测定P2X1、P2X2、P2X3、eNOS、p-eNOS、ROCK1、ROCK2在各组大鼠阴茎海绵体中的表达。结果:6组SD大鼠的周龄、体重比较无显著差异。去势4周组和去势8周组的血清T(5.16±0.23nmol/L、3.18±0.25nmol/L)和阴茎海绵体组织NO含量(6.77±0.38μmol/gprot、3.12±0.42μmol/gprot)显著低于假手术4周组、假手术8周组、去势+睾酮替代治疗4周组、去势+睾酮替代治疗8周组(18.02±2.33nmol/L、17.99±2.12nmol/L、17.86±3.02nmol/L、18.01±2.97nmol/L;12.06±0.79μmol/gprot、12.98±1.34μmol/gprot、12.89±0.62μmol/gprot、13.02±0.57μmol/gprot)(P<0.01)。去势8周组的血清T(3.18±0.25nmol/L)和阴茎海绵体组织NO含量(3.12±0.42μmol/gprot)显著低于去势4周组(5.16±0.23nmol/L、6.77±0.38μmol/gprot)(P<0.05)。去势4周组和去势8周组的ICPmax/MAP显著低于假手术4周组、假手术8周组、去势+睾酮替代治疗4周组、去势+睾酮替代治疗8周组(P<0.01),去势8周组的ICPmax/MAP显著低于去势4周组(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,P2X1、P2X2和P2X3蛋白主要表达于大鼠阴茎海绵体血管平滑肌细胞的胞膜和胞浆内,还表达于大鼠阴茎海绵体血管内皮细胞的胞膜和胞浆内。去势4周组和去势8周组的P2X1、P2X2和P2X3蛋白表达量显著高于假手术4周组、假手术8周组、去势+睾酮替代治疗4周组、去势+睾酮替代治疗8周组(P<0.01)。去势8周组的P2X1、P2X2和P2X3蛋白表达量显著高于去势4周组(P<0.05)。Western blot检测结果显示,去势4周组、去势8周组的P2X1、P2X2、P2X3、ROCK1和ROCK2蛋白表达量显著高于假手术4周组、假手术8周组、去势+睾酮替代治疗4周组、去势+睾酮替代治疗8周组(P<0.01)。去势8周组的P2X1、P2X2、P2X3、ROCK1和ROCK2蛋白表达量显著高于去势4周组(P<0.05);去势4周组、去势8周组的eNOS和p-eNOS蛋白表达量显著低于假手术4周组、假手术8周组、去势+睾酮替代4周组、去势+睾酮替代8周组(P<0.01)。去势8周组的eNOS和p-eNOS蛋白表达量显著低于去势4周组(P<0.05)。各组大鼠血清T水平与P2X1、P2X2、P2X3的表达量呈负相关,相关方程分别为:Y=-3.197+0.008X,r=-0.822,P<0.01;Y=-2.887+0.007X,r=-0.786,P<0.01;Y=-2.997+0.033X,r=-0.674,P<0.01。结论:低雄激素可能通过上调大鼠阴茎海绵体组织中P2X1、P2X2和P2X3受体的表达,上调RhoA/Rho激酶表达,降低p-eNOS/eNOS和减少NO合成,抑制勃起功能。
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