【摘 要】
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目的探讨塞来昔布对结肠癌细胞HT-29凋亡及MIF、PTEN和Caspase-3表达的影响。方法通过MTT比色法、流式细胞术、AO-EB双染法结合荧光显微镜观察等方法研究不同浓度塞来昔布对
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目的探讨塞来昔布对结肠癌细胞HT-29凋亡及MIF、PTEN和Caspase-3表达的影响。方法通过MTT比色法、流式细胞术、AO-EB双染法结合荧光显微镜观察等方法研究不同浓度塞来昔布对结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响;通过RT-PCR、Western印迹检测MIF、PTEN和Caspase-3的表达。结果1.MTT比色法结果显示:在0～100μM范围内不同浓度塞来昔布作用于HT-29细胞不同时间后,细胞存活率随塞来昔布浓度的增加及时间的延长而下降;2.流式细胞术结果显示:在0～100μM范围内不同浓度塞来昔布作用于HT-29细胞24h后,G0/G1期细胞比例和G2/M期细胞比例增加,同时S期细胞比例减少;3.AO-EB染色法结果显示:在0～100μM浓度范围内不同浓度塞来昔布处理HT-29细胞24h后,塞来昔布诱导HT-29细胞凋亡,凋亡小体和凋亡指数随塞来昔布浓度的增加而增加;4.RT-PCR结果显示:在0～100μM范围内不同浓度塞来昔布作用于HT-29细胞24h后,MIF mRNA表达随塞来昔布浓度的增加而下调;5.Western印迹结果显示:在0～100μM范围内不同浓度塞来昔布作用于HT-29细胞24h后,MIF蛋白表达随塞来昔布浓度的增加而下调;PTEN、Caspase-3蛋白表达随塞来昔布浓度的增加而上调。结论1.塞来昔布抑制结肠癌细胞HT-29增殖并诱导其凋亡;2.塞来昔布的这种作用可能与其下调MIF的表达,上调PTEN、Caspase-3的表达有关。
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