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表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EFG)是生长因子家族的重要成员之一,EGF通过与表皮生长因子受体(Epidermal GrowthFactor Receptor,EGFR)结合后启动其下游的信号传导通路而发挥一系列生理及病理作用。EGFR是由1186个氨基酸残基构成,分子量为170kD的一种跨膜糖蛋白。EGFR主要位于细胞质膜上,属于Ⅰ型酪氨酸激酶受体亚族,具有酪氨酸激酶的活性。EGFR稳定的表达于多种上皮组织,以及间质和神经源性组织。不同器官发生的实体瘤也高表达EGFR,如头颈部癌、卵巢癌、宫颈癌、膀胱癌和食管癌等。EGFR受到EGF等配体激活后通过二聚化引发胞内域形成酪氨酸激酶活性,由此启动一系列信号转导通路调节正常细胞的生长和分化,增加肿瘤细胞的侵袭力、促进血管生成、抑制肿瘤细胞的凋亡。EGFR在肿瘤中的高度表达及其在肿瘤细胞生长、分化中起着重要作用的这些特点,使EGFR成为具有良好前景的肿瘤诊断和治疗的靶点。由于EGFR在肿瘤细胞的生长、修复和存活等方面具有极其重要的作用,它的过度表达通常预示患者预后差、转移快、对化疗药抗拒、激素耐药、生存期较短等,因此以EGFR为靶点是一种比较合理的抗癌策略。目前肿瘤分子靶向治疗中研究较多的是以gefitinib(Iressa)和erlotinib(Tarceva)为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosinekinase inhibitor,EGFR-TKI)。早期临床试验表明EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)在部分化疗耐药的非小细胞肺癌(NSCLC)中仍然有较好的疗效。统计显示EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)在女性、腺癌、不吸烟患者和东亚人群中疗效更佳。有研究表明EGFR酪氨酸激酶区突变与EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)疗效密切相关。EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)已在美国、日本及澳大利亚获准临床用于单药治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC),对治疗前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等的大规模临床研究尚在进行中。EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)仅对存在EGFR酪氨酸激酶区域外显子(Exon)19(e19)位点、外显子21的L858R位点有突变的非小细胞肺癌有确切疗效,此突变目前发现外显子19(e19)位点基因缺失(Deletion)(以下简称EGFR mutations(del)),和外显子21的L858R位点点突变(Point mutation)(以下简称EGFR mutations(p)),EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)对外显子19(e19)位点突变的患者治疗效果优于外显子21的L858R位点有突变的非小细胞肺癌患者,且证实上述基因突变与多种因素有关,近年来的一些研究发现EGF、EGFR在肝癌中也存在过度表达,且与肝癌的形成、发生、发展有密切关系。本实验拟在肝癌组织中检测EGFR、EGFR mutations(EGFR mutations(del)和EGFR mutations(p))的表达及其与临床病理关系,为肝癌的分子靶向治疗提供理论依据和临床指导。目的在肝癌组织中检测EGFR、EGFR mutations(EGFRmutations(del)和EGFR mutations(p))的表达及分析其与临床病理关系,为肝癌的分子靶向治疗提供理论依据和临床指导。方法选取78例肝细胞癌(HCC)手术切除的新鲜标本和6例正常肝组织,10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,每个标本行连续切片,厚4um。应用SP免疫组化法,以EGFR、EGFR mutations(del)和EGFRmutations(p)的单克隆抗体对组织切片进行染色。用X~2检验、Spearman’s非参数分析对EGFR、EGFR mutations(del)和EGFRmutations(p)在肝癌组织中的表达与临床病理关系进行分析,对患者术后生存期与各项参数进行Cox多因素回归分析和Kaplan-Meier生存分析。结果1.EGFR在正常肝组织中阳性表达率为66.7%(4/6),EGFRmutations(del)阳性表达率为0(0/6),EGFR mutations(p)表达率为0(0/6);EGFR在肝癌组织中阳性表达率为69.2%(54/78),EGFRmutations(del)阳性表达率为21.8%(17/78),EGFR mutations(p)表达率为9.0%(7/78)。肝癌组织表达EGFR与正常肝组织无差异性(X~2=0.171,P=0.680)、正常肝组织未见EGFR mutations表达,肝癌组织表达EGFRmutations(del)高于EGFR mutations(p)(X~2=4.924,P＜0.05)。2.肝癌组织EGFR mutations的表达情况与女性(r=0.743,p＜0.05)呈正相关,与术前AFP值(r=-0.519,p＜0.05)、乙肝(r=-0.567,p＜0.05)、肝硬化(r=-0.245,p＜0.05)、病理分级(r=-0.273,p＜0.05)呈负相关;肝癌组织表达EGFR mutations(del)与女性(r=0.453,p＜0.05)呈正相关,与术前AFP值(r=-0.243,p＜0.05)、乙肝(r=-0.693,p＜0.05)、肝硬化(r=-0.328,p＜0.05)、病理分级(r=-0.343,p＜0.05)呈负相关;肝癌组织表达EGFR mutations(p)与女性(r=0.390,p＜0.05)呈正相关,与乙肝(r=-0.657,p＜0.05)、病理分级(r=-0.347,p＜0.05)呈负相关,其余参数与EGFR、EGFR mutations的表达无关。上述所有参数与EGFR的表达无关。3.肿瘤病理分级(P＜0.001)和术前AFP值(P＜0.001)是该组肝癌患者术后生存期的主要影响因素。该组肝癌组织EGFR及EGFRmutations表达阴性的患者和表达阳性的患者术后生存期无明显差别(P＞0.05)。结论1.正常肝组织中存在EGFR的表达,未发现EGFR mutations(EGFR mutations(del)和EGFR mutations(p))的表达;肝癌组织中存在EGFR、EGFR mutations(EGFR mutations(del)和EGFR mutations(p))的表达。2.肝癌组织EGFR mutations、EGFR mutations(del)的表达与女性呈正相关,与术前AFP值、乙肝、肝硬化、病理分级呈负相关;肝癌组织表达EGFR mutations(p)与女性呈正相关,与乙肝、病理分级呈负相关,其余参数与EGFR、EGFR mutations的表达无关。上述所有参数与EGFR的表达无关。3.肝癌组织EGFR、EGFR mutations(EGFR mutations(del)和EGFR mutations(p))的表达不是肝癌患者的独立预后因素。