地塞米松对前庭中枢代偿中小脑绒球BDNF、TrkB和KCC2的影响及意义

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目的:探讨前庭外周急性损伤后中枢代偿过程中,地塞米松(Dexamethasone,DXM)对大鼠绒球中BDNF、TrkB和KCC2表达的影响及意义。方法:SD大鼠随机分为五组:生理盐水(Normal saline,NS)组(阴性对照组)、对氨基苯胂酸(Arsanilic acid,AA)组(阳性对照组)、低剂量DXM组、高剂量DXM组和DXM拮抗组。每日给予每只大鼠同侧中耳、腹腔及颈背部皮下注射干预药物各一次,连续三日。于实验第四日,观察大鼠的姿势和运动,记录各组大鼠空中翻正反射阳性率、接触翻正反射时间和头部固定后的前15秒内眼震次数,使用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)、免疫蛋白印迹(Western-blot)和逆转录定量聚合酶链式反应(Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测大鼠绒球中BDNF、TrkB和KCC2的表达水平,使用Prism8统计软件进行单因素方差分析(One-way analysis of variance,One-way ANOVA),P<0.05表示差异有统计学意义。结果:行为学表现上,AA组大鼠与NS组相比产生了严重的前庭功能障碍表现,其翻正反射阳性率降低、接触翻正反射时间延长、自发性眼震次数增加。低剂量和高剂量DXM组的上述表现均较AA组好转,其中高剂量组好转更加明显,而DXM拮抗组大鼠的前庭功能障碍表现较高剂量DXM组更为严重,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。在分子表达上,与NS组给药侧绒球相比,AA组同侧BDNF、TrkB和KCC2的蛋白表达和mRNA表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且与对侧相比差异具有统计学意义(P<0.05)。与AA组相比,低剂量DXM组和高剂量DXM组给药侧绒球中BDNF、TrkB和KCC2的蛋白表达和mRNA表达依次提高,其中高剂量DXM组提高更明显,三个组组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。而DXM拮抗组给药侧绒球中BDNF、TrkB和KCC2的蛋白表达和mRNA表达较高剂量DXM组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:鼓室注射AA可以造成大鼠外周前庭功能损伤;绒球BDNF-TrkB信号的表达下调参与了 AA所致的前庭功能障碍;DXM作用于糖皮质激素受体,激活绒球BDNF-TrkB信号,上调KCC2可能是其促进前庭中枢代偿的途径之一。
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