温郁金组培快繁体系的建立及质量初步评价研究

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温郁金为姜科植物温郁金(Curcuma. wenyujin Y.H.Chen et C. Ling)的干燥块根,具有活血止痛,行气解郁,清心凉血,利胆退黄之功效。现代常用于治疗肝炎、高脂血症、胆囊炎、精神分裂症、癫痫、肿瘤等。温郁金是一种具有广泛应用价值的植物资源,但由于温郁金粗放的传统种植模式与长期的无性繁殖,用种量大,生长周期长,病害时有发生,导致其品种退化,质量下降。利用组织培养技术,不仅可以进行大规模的快速繁殖,保存温郁金优良种质资源,防止品种退化,还大大节约了人力、物力。因此,建立温郁金组培快繁体系具有重要意义。本课题建立了系统、完善的温郁金组培快繁体系,并进一步对组培温郁金与普通温郁金进行了初步的质量评价与比较研究,不仅填补了在此方面的空白,更为组培温郁金的质量稳定、可控与未来的临床应用提供了一定的科学依据。温郁金组培快繁体系建立方面:本课题以前期筛选出的种质优良、生长健壮、无病虫害的温郁金植株为母珠进行外植体的筛选,最终筛选出主根茎上的萌动芽作为最佳的外植体,消毒方法为去除主根茎表皮后用75%酒精消毒5秒后再用0.1%升汞消毒13分钟。适宜的芽诱导及恢复生长培养基为MS+6-BA浓度a3培养基;适宜的丛生芽诱导及增殖培养基为MS+激素M浓度f1+NAA浓度e:;培养基,本课题首次将激素M应用在温郁金组织培养中;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA浓度e。培养基;温郁金试管苗经炼苗后移栽至育苗盘培养,适宜的移栽基质为移栽基质3。综合考虑组培温郁金的产量、物质含量,运用加权评分法首次对组培温郁金的适宜移栽期与采收期进行了研究,结果显示:组培温郁会移栽至大田的适宜时间为移栽期2,适宜的采收期为采收期2-采收期4。组培温郁金质量的初步评价研究方面:首次对组培温郁金与普通温郁金进行了初步的质量评价与比较研究。在原植物形态学方面,除组培温郁金在栽培过程中未见到开花,未能与普通温郁金进行花序、颜色等方面的比较外,其余原值物形态特征基本一致;在药材性状特征方面,组培温郁金与普通温郁金药材在性状特征上差异极小,仅在大小上有所不同;在显微特征方面,组培温郁金与普通温郁金叶片上、下表面显微特征、块根横切面及粉末显微特征基本一致。在薄层色谱鉴别方面,一年生的组培温郁会和普通温郁金薄层色谱特征与郁金对照药材相同;两年生的组培温郁金与普通温郁金薄层色谱特征相似,仅在Rf值0.57处,组培温郁金比普通温郁金多出一个亮蓝色斑点,且二者与郁金对照药材薄层色谱差异较大,因此合理的生长年限与适宜的采收期对温郁金质量的控制意义重大。研究进一步显示:组培温郁金与普通温郁金水分、总灰分含量均符合2010版《中国药典》一部郁金项下的有关规定。浸出物测定方面,普通温郁金两年生>组培温郁金两年生>组培温郁金一年生>普通温郁金一年生。有效成分含量方面,相同生长年限的温郁金,在挥发油、总姜黄素、吉马酮、莪术二酮含量方面,组培温郁金均高于相应的普通温郁金:其中一年生的组培温郁金尤其是总姜黄素、吉马酮、莪术二酮含量分别高出普通温郁金1.41倍、1.55倍、4.22倍;两年生的组培温郁金尤其是莪术二酮含量高出普通温郁金1.4倍。不同生长年限的温郁金,挥发油含量稍有下降,总姜黄素含量变化不大,吉马酮、莪术二酮含量差异较大,其中组培温郁金两年生吉马酮、莪术二酮含量分别高于一年生0.5倍、0.96倍,普通温郁金两年生分别高于一年生1.46倍、3.23倍。目前,关于温郁金组培快繁体系的建立及组培温郁金质量评价的报道尚无,本课题的实施尚属首次,不仅填补了这方面的空白,也为组培温郁金的药用提供了一定的科学依据。
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