三种厌氧功能菌株的分离鉴定和系统发育分析

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目前,我国多数油田已进入高含水期,这将对原油的集输管线、回注管线及污水处理系统带来严重的腐蚀危害。在油田注水系统中,硫酸盐还原菌(SRB)是微生物腐蚀(MIC)的主要因素之一。微生物腐蚀广泛存在于土壤?海水供水系统及油田环境,而且已经造成了程度不同的腐蚀破坏?据统计,许多严重的腐蚀破坏,70%~80%直接由细菌引起或者与细菌有关,特别是硫酸盐还原菌。本课题改良了传统的厌氧培养方法;改良了硫酸盐还原菌、反硝化细菌的选择性培养基;开发了同步反硝化硫酸盐还原菌的选择性培养基;运用原子力显微镜对菌株进行形态观察,运用16SrDNA和脂肪酸鉴定方法对菌株进行系统发育分析,采用离子色谱方法记录培养液中的NO3-、NO2-和SO42-浓度,对菌株进行功能验证;对几株分离的硫酸盐还原菌进行了聚丙烯酰胺降解特性的测定。分离得到三株硫酸盐还原菌H1、I7和I8。经生理生化鉴定得出,H1为短杆芽孢杆菌,严格厌氧;经16SrDNA和脂肪酸鉴定得出,该菌株为梭杆菌,暂命名为Clostridium Clostridium bifermentans H1;经测定,其对聚丙烯酰胺的去除率为30.8%。对I7菌株的鉴定方法基本同上,所得出的结论为该菌为短杆无芽孢菌,严格厌氧,初步鉴定为Enterobacter中的新种,暂命名为Enterobacter cloacae I7,属于一般丙烯酰胺低聚体的衍生物。I8菌株也为短杆菌,兼性厌氧,初步鉴定为肠杆菌中的一个新种,暂命名为Enterobacter HPAMDegraded Bacteria I8。分离得到三株反硝化细菌F1、F18和F22-1,均为革兰氏阴性菌,在严格厌氧环境下生长速度较硫酸盐还原菌稍慢。经16SrDNA和脂肪酸鉴定得出,三株菌分别为Clostridium butyricum F1,对NO3-去除率为39.17%;Clostridium sp. F18,对NO3-去除率为58.56%;Thauera sp. F22-1,对NO3-去除率为44.56%。分离得到三株同步反硝化硫酸盐还原菌SN10,SN9,SN22-2,初步鉴定三株菌分别为Paenibacillus sp. SN10,对NO3-的去除率为98.52%,对SO 42-的去除率为96.49%;Paenibacillus lautus SN9,对NO3-的去除率为97.76%,对SO 42-的去除率为96.22%;Bacillus coagulans SN22-2,对NO3-的去除率为97.98%,对SO 42-的去除率为96.48%。
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