论文部分内容阅读
目的:本研究通过五倍瘢痕膏对兔耳增生性瘢痕形态结构、组织病理学改变及瘢痕组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达干预情况,探讨五倍瘢痕膏对于增生性瘢痕的治疗机制。为开发安全有效的抗增生性瘢痕中药外用剂提供实验和理论依据。
方法:在该实验中,选择了24只健康清洁的新西兰大耳白兔。体重范围2.5-3.5kg,兔龄3-4m,雌雄均可(不包含孕兔),双侧兔耳完整,无畸形。避开兔耳大血管,沿长轴走形在腹侧进行增生性瘢痕模型建立,每只兔耳制作圆形创面6个,合计288个创面。根据随机数表方法,动物被随机分为6组,即:A空白组、B凡士林组、C硅酮霜组、D低浓度组(25%五倍瘢痕膏),E中浓度组(50%五倍瘢痕膏)、F高浓度组(75%五倍瘢痕膏),术后常规消毒,待术后28d创面完全上皮化后开始用药,各组取等量膏剂均匀涂抹至每个瘢痕表面,2次/日,连续用药28d。用药期间根据温哥华瘢痕量表,观察兔耳瘢痕的外观形态改变情况,包括瘢痕颜色、瘢痕柔韧性以及瘢痕的体表高度评估各组瘢痕的生长及消退情况;用药后第28天制取瘢痕标本,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色后在光学显微镜下观察兔耳组织的病理变化,测量瘢痕增生指数、成纤维细胞数密度;经Van Gieson染色后计算胶原纤维的面密度;分别用免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法(Western-blotting,WB)检测兔耳皮肤瘢痕组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达情况。应用统计软件SPSS23.0对实验数据进行统计分析,对比评估各组用药疗效。
结果:1.五倍瘢痕膏能够很好的改善兔耳皮肤瘢痕皮损形态,使瘢痕变得柔软,厚度变薄,颜色变浅。2.五倍瘢痕膏与空白组相比较,可使兔耳瘢痕组织中成纤维细胞数量减少,胶原纤维密度降低,减少兔耳瘢痕的瘢痕增生指数,其中以50%五倍瘢痕膏效果最好;3.免疫组化法检测组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况:①硅酮霜组CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显低于空白组、凡士林组和五倍瘢痕膏组,差异有统计学意义(P<0.05);②五倍瘢痕膏组CollagenⅠ、CollagenⅢ表达情况与空白组相比较有统计学意义,以50%五倍瘢痕膏组明显;③50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);④凡士林组与75%五倍瘢痕膏组比较结果不具有统计学意义。4.用蛋白质印迹法检测兔耳增生性瘢痕中Ⅰ型胶原表达情况示:①硅酮霜组与五倍瘢痕膏组、空白组、凡士林组对比结果有统计学意义(P<0.05);②50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组胶原表达有统计学意义(P<0.05);③50%五倍瘢痕膏组与空白组、凡士林组对比差异有统计学意义(P<0.05);④凡士林组与75%五倍瘢痕膏组、25%五倍瘢痕膏组比较,差异无统计学意义。Ⅲ型胶原表达情况示:①硅酮霜组与五倍瘢痕膏组、空白组、凡士林组对比结果有统计学意义(P<0.05);②五倍瘢痕膏组与空白组、凡士林组对比差异有统计学意义(P<0.05);③50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组结果有统计学意义(P<0.05);④空白组与凡士林组相比差异无统计学意义。
结论:1.五倍瘢痕膏治疗兔耳增生性瘢痕有效,可以改变其形态学和组织病理学表现,使瘢痕组织颜色变浅,厚度变薄,瘢痕质地更柔和;2.五倍瘢痕膏可以减少成纤维细胞的数量,抑制胶原纤维过度沉积,其中以50%五倍瘢痕膏作用最为显著;3.五倍瘢痕膏能有效降低兔耳增生性瘢痕中Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量,抑制Ⅰ型和Ⅲ型胶原在皮肤组织中沉积,达到抑制瘢痕形成,促进瘢痕软化、修复的作用。
方法:在该实验中,选择了24只健康清洁的新西兰大耳白兔。体重范围2.5-3.5kg,兔龄3-4m,雌雄均可(不包含孕兔),双侧兔耳完整,无畸形。避开兔耳大血管,沿长轴走形在腹侧进行增生性瘢痕模型建立,每只兔耳制作圆形创面6个,合计288个创面。根据随机数表方法,动物被随机分为6组,即:A空白组、B凡士林组、C硅酮霜组、D低浓度组(25%五倍瘢痕膏),E中浓度组(50%五倍瘢痕膏)、F高浓度组(75%五倍瘢痕膏),术后常规消毒,待术后28d创面完全上皮化后开始用药,各组取等量膏剂均匀涂抹至每个瘢痕表面,2次/日,连续用药28d。用药期间根据温哥华瘢痕量表,观察兔耳瘢痕的外观形态改变情况,包括瘢痕颜色、瘢痕柔韧性以及瘢痕的体表高度评估各组瘢痕的生长及消退情况;用药后第28天制取瘢痕标本,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色后在光学显微镜下观察兔耳组织的病理变化,测量瘢痕增生指数、成纤维细胞数密度;经Van Gieson染色后计算胶原纤维的面密度;分别用免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法(Western-blotting,WB)检测兔耳皮肤瘢痕组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达情况。应用统计软件SPSS23.0对实验数据进行统计分析,对比评估各组用药疗效。
结果:1.五倍瘢痕膏能够很好的改善兔耳皮肤瘢痕皮损形态,使瘢痕变得柔软,厚度变薄,颜色变浅。2.五倍瘢痕膏与空白组相比较,可使兔耳瘢痕组织中成纤维细胞数量减少,胶原纤维密度降低,减少兔耳瘢痕的瘢痕增生指数,其中以50%五倍瘢痕膏效果最好;3.免疫组化法检测组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达情况:①硅酮霜组CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显低于空白组、凡士林组和五倍瘢痕膏组,差异有统计学意义(P<0.05);②五倍瘢痕膏组CollagenⅠ、CollagenⅢ表达情况与空白组相比较有统计学意义,以50%五倍瘢痕膏组明显;③50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);④凡士林组与75%五倍瘢痕膏组比较结果不具有统计学意义。4.用蛋白质印迹法检测兔耳增生性瘢痕中Ⅰ型胶原表达情况示:①硅酮霜组与五倍瘢痕膏组、空白组、凡士林组对比结果有统计学意义(P<0.05);②50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组胶原表达有统计学意义(P<0.05);③50%五倍瘢痕膏组与空白组、凡士林组对比差异有统计学意义(P<0.05);④凡士林组与75%五倍瘢痕膏组、25%五倍瘢痕膏组比较,差异无统计学意义。Ⅲ型胶原表达情况示:①硅酮霜组与五倍瘢痕膏组、空白组、凡士林组对比结果有统计学意义(P<0.05);②五倍瘢痕膏组与空白组、凡士林组对比差异有统计学意义(P<0.05);③50%五倍瘢痕膏组与25%五倍瘢痕膏组、75%五倍瘢痕膏组结果有统计学意义(P<0.05);④空白组与凡士林组相比差异无统计学意义。
结论:1.五倍瘢痕膏治疗兔耳增生性瘢痕有效,可以改变其形态学和组织病理学表现,使瘢痕组织颜色变浅,厚度变薄,瘢痕质地更柔和;2.五倍瘢痕膏可以减少成纤维细胞的数量,抑制胶原纤维过度沉积,其中以50%五倍瘢痕膏作用最为显著;3.五倍瘢痕膏能有效降低兔耳增生性瘢痕中Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量,抑制Ⅰ型和Ⅲ型胶原在皮肤组织中沉积,达到抑制瘢痕形成,促进瘢痕软化、修复的作用。