野菊花的质量控制方法及其注射用标准提取物的制备

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野菊花为菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L. )的干燥头状花序,本论文主要研究了野菊花药材的质量控制方法及其注射用标准提取物的制备工艺。首先,对野菊花药材的质量控制方法进行了研究。采用紫外-可见分光光度法测定了10批野菊花药材中总黄酮的含量;采用高效液相色谱法同时测定了10批野菊花药材中绿原酸和咖啡酸的含量,其色谱条件为:采用Thermo Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.5%醋酸水溶液(20:80,v/v)为流动相,流速为0.8mL·min-1,室温下于325nm进行检测,所收集的药材中绿原酸的含量在0.26~0.74%之间,咖啡酸含量在0.0050~0.056%之间;同时测定了10批野菊花药材中蒙花苷和木犀草素的含量,其色谱条件为:采用Thermo Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-四氢呋喃-水(50:4:46,v/v)为流动相,流速为0.6mL·min-1,室温下于350nm进行检测,所收集的药材中蒙花苷的含量在0.50~2.7%之间,木犀草素含量在0.037~0.09%之间;以绿原酸为参照物,建立了野菊花药材的高效液相色谱指纹图谱,实现了对其化学成分色谱峰的基本分离,确定了15个共有指纹峰。采用国家药典委员会的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度计算,建立了野菊花药材指纹图谱的共有模式,结果10批野菊花相似度:在0.90以上,6批的相似度在0.90以下。其次,实验中为了得到野菊花注射用标准提取物,对野菊花药材的提取纯化工艺进行了考察。最佳工艺确定为野菊花药材粉末以70%乙醇水浴(90℃)回流提取3次,每次1h,提取溶媒量依次为16倍、8倍、8倍。合并提取液,提取液减压浓缩至无醇味,浓缩液加水至药材量的20倍,水浴(90℃)中加热15min,取出,离心(3000rpm)15min,取上清液,以10%盐酸溶液调pH为3.0,上样至已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1:10),上样量为1mL树脂上样0.4g生药的药液,以2BV·h-1(BV,柱床体积)的流速进行吸附,先以5BV的5%乙醇洗,再以5BV的50%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱液。减压浓缩大孔吸附树脂洗脱液至约为药材量20倍的水溶液,上样至已处理好的聚酰胺树脂柱(径高比1:10),上样量为1mL树脂上样0.2g生药的药液,以2BV·h-1的流速进行吸附,2BV的水洗,5 BV的70%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱液,浓缩干燥成粉末,即得。所得提取物中绿原酸与蒙花苷占总固形物含量之和在25%以上。
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