【摘 要】
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目的:探讨磷脂转运蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)在烟草提取物(Cigarette smoke extract,CSE)诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-m
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目的:探讨磷脂转运蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)在烟草提取物(Cigarette smoke extract,CSE)诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法:RLE-6TN细胞株体外培养24 h,分为4组,每组3孔,分别加入0%,0.25%,0.5%和1%CSE共培养2天,RT-PCR法检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3天Western blot法检测PLTP、EMT相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白)的表达量。将PLTP-siRNA转染入RLE-6TN中,Western blot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响。结果:不同浓度的CSE作用后,E-钙黏蛋白mRNA分别为(1.01±0.05),(0.74±0.05),(0.65±0.03),(0.30±0.08),呈浓度依赖下降;波形蛋白mRNA在1%CSE(1.88±0.49)与对照组表达(1.01±0.20)相比增加。PLTP蛋白含量分别为(0.42±0.02),(0.89±0.25),(1.08±0.18),(1.61±0.06);E-钙黏蛋白蛋白含量分别为(1.61±0.040),(1.08±0.10),(0.63±0.08),(0.68±0.17);N-钙黏蛋白蛋白含量分别为(0.60±0.15),(0.57±0.26),(0.88±0.30),(1.94±0.54);波形蛋白蛋白含量分别为(0.61±0.05),(0.98±0.16),(1.07±0.14),(1.34±0.19)。与对照组比,1%实验组差异有统计学意义(均P<0.05)。PLTP-si RNA和CSE处理细胞后,E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.05),N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低(P<0.05),PLTP-siRNA可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化。结论:1、CSE可激活PLTP诱导肺泡上皮细胞发生上皮间质转化。2、PLTP-siRNA可敲降PLTP表达,并能部分逆转CSE诱导的肺泡上皮间质转化。故PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化。
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