【摘 要】
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本研究主要目的是利用细胞转染,细胞毒性以及理化实验等表征手段对合成出的一系列基因载体材料进行评价,筛选出转染效率高、细胞毒性低的载体材料,并对其转染行为做进一步的
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本研究主要目的是利用细胞转染,细胞毒性以及理化实验等表征手段对合成出的一系列基因载体材料进行评价,筛选出转染效率高、细胞毒性低的载体材料,并对其转染行为做进一步的分析。因为低分子量PEI细胞毒性小,但转染效率极低,而高分子量PEI转染效率比较高,细胞毒性却很大,所以本文主要通过使用不同的交联剂,交联低分子量聚乙烯亚胺(PEI)以及PBLG修饰的PEI(PEIPBLG),得到一系列高专染效率、低细胞毒性的基因载体材料。首先,以纳米金为核心,交联PEI和PEIPBLG,形成类似星形的交联产物。通过调节Au与PEI或PEIPBLG的摩尔比例(主要为1:3;1:5;1:10)以及PEI与PBLG的质量比(主要有5:5;6:4),合成了一系列材料。通过实验,我们发现,随着金含量的减少,材料的转染效率在增高,细胞毒性在降低,接枝PBLG的材料,细胞毒性得到了进一步的降低。其次,根据二硫键在细胞内对还原型谷胱甘肽的响应而断裂的性质,我们用含二硫键的交联剂交联PEI(PBLG)[这个是指PEI或者PEIPBLG还是别的意思]得到了可降解的载体材料。由于材料的可降解性,使得它有利于把复合的DNA释放出来,有利于提高转染效率,并且这也使细胞毒性得到进一步降低。总之,通过交联低分子量的PEI(PBLG),我们成功制备出了几种细胞毒性较小,而转染效率比较高的载体材料,其综合性能超过商业化的转染试剂PEI25K。本文开发的材料有希望作为体内转染试剂获得进一步的应用。
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