肿瘤干细胞是肿瘤组织中能够自我复制及分化的一个重要的细胞亚群,在肿瘤的发生与发展中起着重要的作用。干细胞自我复制和多项分化的潜能与其特殊的周期状态密不可分。但是,在肿瘤研究领域中,人们对用肿瘤干细胞的周期状态了解甚少。明确肿瘤干细胞的周期调控机制,不仅有助于我们阐明肿瘤干细胞的自我复制和分化的机理、解释肿瘤的复发和转移的机制,而且对临床治疗以及新药物的开发有着重要的提示作用。我们采用侧群细胞分选的方法,有效富集了两株食管癌细胞系EC9706和KYSE150中的肿瘤干细胞。通过PI标记DNA含量的方法,我们发现肿瘤干细胞处于Go/G,期的细胞明显多于普通肿瘤细胞。Hoechst33342/PY双染实验证明了肿瘤干细胞中大约有60%-70%的细胞处于G0期,而普通肿瘤细胞处于G0期的比例仅为20%-30%。我们通过BrdU掺入实验发现,在标记BrdU的72小时内,肿瘤干细胞进入细胞周期的比例明显小于普通肿瘤细胞。以上结果提示我们,肿瘤干细胞多数处于静止期,呈现增殖不活跃状态。为了明确肿瘤干细胞对于DNA损伤因素的反应,我们应用高能X线、顺铂和紫外线对细胞加以处理。我们发现,肿瘤干细胞对DNA损伤因素有更强的抵抗能力,并且在DNA损伤后有效地将细胞阻滞于DNA合成或细胞分裂之前。综上所述,本课题对肿瘤干细胞的周期状态和DNA损伤后的周期改变做了初步的探索。我们的结果可能对阐明肿瘤干细胞在肿瘤复发、转移和放化疗抵抗中的作用和机制提供帮助和启迪。