脊髓损伤是指脊髓在结构和功能上受损,以致神经功能失常,导致骨骼肌随意运动能力减弱或丧失的一种中枢系统疾病。缺氧是脊髓损伤后常见的病理状态,而中枢神经系统的神经元对内环境变化极为敏感,缺氧不仅可以造成神经元变性、坏死,而且还会加重脊髓继发性损伤。小胶质细胞作为脊髓组织中固有免疫细胞,在缺氧发生时,可响应缺氧信号的刺激而发生活化,使相关的信号通路被激活,对脊髓损伤后的病理生理进程进行调控。而小胶质细胞活化是高度能量依赖的过程,ERRα作为能量代谢调节的关键因子,在维持细胞稳态平衡中发挥重要作用,缺失可导致机体抗氧化应激能力紊乱。目前,关于ERRα在缺氧损伤的脊髓小胶质细胞中的作用并未得到充分的阐述。因此,本试验选用BV2小胶质细胞进行体外培养,建立缺氧损伤模型,以验证ERRα在小胶质细胞缺氧损伤中的作用。本研究利用CoCl2刺激BV2小胶质细胞构建细胞缺氧模型。采用不同浓度CoCl2刺激BV2小胶质细胞,通过激光共聚焦技术并结合CCK-8活力检测试验,筛选CoCl2的处理浓度及时间。结果显示,氯化钴浓度为100μmol/L时,BV2小胶质细胞活力未受到明显影响,且该浓度处理8h时,细胞内响应缺氧的HIF-1α表达量最多且由细胞质转移至细胞核内,说明此时BV2小胶质细胞已经发生缺氧,以此判断BV2小胶质细胞缺氧模型成功建立。为探讨ERRα在缺氧BV2小胶质细胞自噬中发挥的作用,本研究检测了自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平,以及自噬基因p62的mRNA水平。结果显示,ERRα能显著下调自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平,以及自噬相关基因p62mRNA水平,提示ERRα抑制缺氧BV2小胶质细胞的自噬。为探讨ERRα在缺氧BV2小胶质细胞中NF-κB炎症信号通路的变化,本研究检测了NF-κB炎症信号通路中p65、p38、IκB-α的蛋白表达水平,炎症相关因子IL-1、IL-6、TNF-α、p65、IL-4、IL-10的mRNA表达水平。结果显示,ERRα能显著下调p38磷酸化水平,提示ERRα可能抑制p38MAPK信号通路的激活;ERRα能显著下调促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、p65以及IL-10的mRNA水平,显著上调抗炎因子IL-4mRNA水平,提示ERRα可能通过调控抗炎因子的表达影响脊髓缺氧损伤后继发炎症反应的进程,防止炎症通路过度活化损伤神经细胞。为探讨ERRα对缺氧小胶质细胞增殖及迁移的影响,本研究检测了FNDC5、BDNF、ERK1/2的蛋白表达水平,通过细胞划痕实验检测其伤口愈合率变化。结果表明ERRα提高了BV2小胶质细胞伤口愈合率,且ERRα能显著上调FNDC5蛋白水平、显著下调BDNF蛋白水平,提示ERRα可能是通过调节FNDC5的表达,促进BV2小胶质细胞增殖,从而对损伤修复发挥积极作用。