【目的】 通过结扎成年Wistar大鼠隐神经,提取大鼠自体激活雪旺细胞,将其移植入T10急性脊髓损伤部位,对其脊髓损伤后肢体感觉、运动功能的恢复情况进行功能行为学、神经电生理学和组织学评价,探讨自体激活雪旺细胞移植在脊髓损伤修复过程中所起的作用,并评价该治疗方法的效果。 【方法】 将30只Wistar成鼠(雌性,250±20g)分为三组:空白对照组;自体未激活雪旺细胞移植组及自体激活雪旺细胞移植组。实验组结扎单侧隐神经,1周后取出结扎远端的神经组织,采用组织块法分离、培养、纯化自体激活雪旺细胞;雪旺细胞移植组直接取出单侧隐神经,提取雪旺细胞,进行体外传代培养和纯化。并对两组实验动物一对一标记,待两种细胞稳定传4代后,用改良Allens’法建立大鼠T10急性脊髓损伤模型,将纯化、生长良好的自体雪旺细胞以微量注射器移植入损伤部位及其两侧各2～3mm。空白对照组脊髓损伤后不进行细胞移植而在其局部以同样方法注射无细胞培养基(DMEM)。术后认真护理,并在术前、术后3天内的每一天,术后1周以及术后1周后的每周,1月后的每2周对实验动物进行脊髓功能评分(BBB法);分别于术前及术后第1天、4周、8周、12周采用NICOLET Viking IVB型肌电图仪对其下肢进行SEP、MEP检查。12周后对动物进行10%BDA神经示踪标记,标记2周后处死动物。取出动物脊髓组织,-18℃冰冻切片并进行Cy3荧光素染色,P75免疫组化染色、脊髓组织HE染色。对手术前后动物脊髓功能行为学评分、脊髓组织染色结果进行定性和定量分析。 【结果】 自体激活雪旺细胞较雪旺细胞生长分化良好;12周后自体激活雪旺细胞移植组和雪旺细胞移植组大鼠双下肢感觉和运动功能恢复较空白对照组满意;BDA顺行示踪,HE染色显示自体激活雪旺细胞移植组和雪旺细胞