广藿香水提物HPLC指纹图谱的再研究

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广藿香(Pogostemon cablin (Blanco) Benth.)为唇形科刺蕊草属植物,是常用的芳香化湿中药。近代,在挥发油是某些药用植物的活性成分的影响下,人们普遍认为挥发油是广藿香的主要有效成分。但进一步的研究结果表明,广藿香水提物具有较显著的生理活性,更能代表广藿香“芳香化湿、和胃止呕,发表解暑”的功效。因此,极有必要对广藿香水溶性成分进行深入研究,阐明其药效物质基础,建立科学的质量标准,用于保证用药的安全性与有效性。在广藿香有效成分尚不完全清楚的情况下,应用HPLC色谱指纹图谱技术于广藿香的质量控制,将是十分有用的。在前人研究工作基础上,本文应用HPLC色谱指纹图谱技术对广藿香水提物的不同极性萃取物以及不同产地、不同采收时间、不同贮藏时间、不同药用部位广藿香进行了指纹图谱的再研究,建立了能反映广藿香整体成分,可用于广藿香品质评价的标准HPLC色谱指纹图谱,为广藿香与制剂的鉴别及其质量控制提供依据。本文选取了氯仿,乙酸乙酯和正丁醇三个不同极性溶剂进行极性由小到大的萃取,对每一个极性部分分别进行了色谱条件选择和确定,建立了广藿香的不同极性萃取物的HPLC标准指纹图谱,以各色谱峰的相对保留时间、相对峰面积比值作为鉴别参数;并在氯仿部分归属了广藿香酮的吸收峰,在乙酸乙酯部分归属了香草酸、原茶儿酸和芹菜素7-0-β-D-葡萄糖苷的吸收峰。经过方法学验证,证明指纹图谱的重现性好,样品在48小时内稳定,仪器精密度高。比较研究了广藿香不同产地、不同采收期和贮存期以及不同药用部位的HPLC指纹图谱的差异。在不同产地的广藿香HPLC指纹图谱比较中,我们选取道地药材黄村9808(石牌藿香)为比较的标准,高要广藿香与之比较相似度高,均大于0.9,认为其品质与道地药材相近。吴川和万宁产地的广藿香与黄村比较,相似度各极性部分均各不相同:氯仿部分为0.854和0.829,乙酸乙酯部分为0.820和0.948,正丁醇部分为0.943和0.925,极性较大的部分差异较小。不同采收期和贮存期的广藿香的指纹图谱的比较中发现,采收期的差异对广藿香的非挥发性成分影响较小,主要差异在于含量,各不同极性萃取部分的相似度均大于0.9;但是贮存时间对广藿香水提物成分有较大影响,特别是极性较大的成分的影响尤为明显,以1997年12月的高要广藿香为标准,比较2007年12月的高要广藿香,在氯仿、乙酸乙酯和正丁醇三部分的相似度分别为0.921、0.422、0.088,表明贮存时间对广藿香水提物成分有较大影响,其相似度随极性增大而减小。比较广藿香的不同药用部位的水提物,广藿香叶的三个不同极性的萃取部分的指纹图谱显示的成分比其茎要丰富得多,而且在含量上也比茎的高。以上研究结果可作为广藿香药材道地性、真伪鉴别及品质评价的依据。
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