实验目的：研究独一味环烯醚萜苷(IGLR)对大鼠急性IBD模型的治疗作用；为将IGLR开发成为治疗IBD的有效新药提供实验依据和理论基础。实验方法：1分组：将90只Wistar大鼠随机分成9组：正常对照组(C)、TNBS模型对照组(M1)、TNBS模型的IGLR高、中、低(300mg/kg、 150mg/kg、75mg/kg)三种剂量治疗组(T1h、T1m、T1l)、柳氮磺吡啶(SASP)阳性对照组(S1), DSS模型对照组(M2)、DSS模型的IGLR 300mg/kg治疗组(T2)、SASP阳性对照组(S2)。2大鼠IBD模型制作：用TNBS-无水乙醇(1：1)溶液一次性灌肠诱导大鼠TNBS性IBD模型；给予6% DSS溶液自由饮用8天诱导大鼠DSS性IBD模型；C组以等量蒸馏水灌肠或饮用。3给药和结果观察：造模完成后次日开始灌胃给药,各对照组给等容积蒸馏水,期间观察大鼠活动、大便性状及隐血检测；连续处理7天后处死大鼠,取结肠组织标本,观察记录各组大鼠结肠病变；HE染色光镜下观察各组组织学改变并进行组织学评分；取结肠标本做分子生物学机制研究。4分子生物学相关指标检测：采用IHC法检测结肠组织MPO及EPO的表达；采用ELISA法检测血清标本中INF-γ、IL-4、IL-10及IL-17的表达；采用Western Blot法及RT-PCR法检测结肠组织中GATA-3、T-bet、Foxp3、ROR-yt蛋白及其mRNA的表达。实验结果：1一般状况：M1,T11组大鼠实验期间期间毛发竖立,进食、饮水及活动显著减少,体重明显下降,腹胀,无排便,DAI呈较恒定高水平,与M1相比,S1、T1m及T1h大鼠在给药第2-4天起开始排便,体重回升,一般状况明显好转,给药两天后起,DAI呈明显下降趋势；M2组大鼠在实验期间一般状况差,出现大量稀便及脓血便,体重明显降低,DAI呈持续高水平,无明显下降,与M2相比S2、T2组于治疗开始后2-3天基本无肉眼血便,6-7天时大便呈梭形固体颗粒,隐血(-),体重逐渐恢复,但未达C组水平,给药后3天起DAI下降趋势明显。2结肠组织大体形态及组织学改变：结肠组织肉眼观察表明,M1组存在大片肠壁溃疡,部分节段肠壁僵硬,完全失去活性,组织学评分与C组差异显著(p<0.05),T11组有一定缓解,但不明显,S1、T1h及Tim溃疡面明显缩小,仍存在部分小片及点状溃疡,评分与M1存在显著差异(p<0.05)；M2组大鼠结肠壁溃疡、水肿、充血严重,有明显出血灶及血丝,评分与C组相较差异显著(p<0.05),S2及T2组结肠壁溃疡、水肿、充血、出血明显减少,存在少量出血点,与M2相比评分下降具有统计学意义(p<0.05)。HE染色后光镜下可见M1组肠壁组织破坏深达肌层,大量组织坏死及炎症细胞浸润；与M1组相较,S1、Ti1、T1h及Tim组有不同程度缓解,呈剂量依赖性；M2组可见肠黏膜细胞肿胀坏死,但损伤未达肌层,S2及T2可见炎症修复和及再生的腺体及杯状细胞。与C组相比,M1、M2组织学评分显著升高(p<0.05),而各治疗组均呈显著下降(p<0.05)。3 HIC检测MPO及EPO：与C组对照,M1及M2组大鼠结肠溃疡组织处MPO及EPO均表达增强,呈棕黄色深染,其主要分布于胞浆内,炎症致细胞破坏后,MPO及EPO大量溢出,检测评分结果升高显著(p<0.05)。经IGLR和SASP处理7天后,与M1或M2组相比,各给药组大鼠结肠病变区MPO及EPO均表达均呈现不同程度的降低(p<0.05)。4 ELISA检测血清蛋白：检测结果显示,与C组相比,INF-γ及IL-17在M1、M2组中均有显著升高,IL-10则显著下降,IL-4仅在M2中出现明显下降(p<0.05)；治疗后,各治疗组INF-γ均出现显著下降(p<0.05), IL-10均出现显著上升(p<0.05), IL-17在S1、T1m、T1h、S2及T2组中出现明显下降(p<0.05),在TNBS诱导的炎症性肠病模型中IL-4无显著变化,而在DSS模型的治疗组S2、T2中有明显回升(p<0.05)。5结肠溃疡组织蛋白质及mRNA表达：检测结果提示,与C组对照,Ml及M2组在溃疡组织处T-bet和ROR-yt的蛋白及mRNA表达均显著提升(p<0.05),经过治疗,T2、S2、Tim及T1h均出现显著下降(p<0.05); GATA-3蛋白及mRNA在M1组中表达量改变不显著,而在M2组中明显上升(p<0.05),治疗后T2、S2及T1h出现表达量下降,其该变量具有统计学意义(p<0.05); Foxp3的表达在M1及M2组中均显著降低(p<0.05),而与之相比,所有治疗组表达均出现明显升高(p<0.05)。实验结论：1 TNBS诱导的大鼠IBD模型主要表现为腹胀、便秘及体重急剧下降,严重的结肠炎性反应,大片结肠壁溃疡,部分节段肠壁僵硬,溃疡深达肌层,其免疫病理学改变以Thl及Th17细胞因子作用为主导；DSS诱导的大鼠IBD模型以腹泻、脓血便及体重急剧下降为主要表现,结肠炎性反应严重,溃疡主要损伤结肠黏膜层,以水肿、出血为主,镜下可见腺窝缺损和杯状细胞破坏,其免疫病理学改变可能包括Th1、Th2及Th17细胞因子等的共同作用。2 IGLR对TNBS及DSS诱导的两类大鼠IBD模型均有显著疗效,可有效抑制IBD的炎症反应和结肠损伤。3 IGLR对大鼠1BD治疗作用的机制可能是通过调节Th1、Th2及Th17细胞因子及其转录因子T-bet、GATA-3及RORyt的表达,抑制其炎症反应及结肠损伤而产生。4 IGLR还通过促进Treg细胞因子及其转录因子Foxp3的表达,产生其抗炎及治疗IBD的作用。