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目的:研究黑蒜提取液的放射增敏作用,初步探究自噬和自噬性死亡在黑蒜提取液对肝癌Huh7细胞放射增敏效应中的作用。方法:选择人肝癌Huh7细胞作为研究对象,设立空白对照组,以最终浓度为0. 1g/ml、0. 3g/ml、0. 5g/ml/0. 7g/ml、1.0g/ml的药物作为黑蒜提取液组,0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy60Coγ线照射作为放射组,黑蒜提取液低浓度(0.3g/ml)联合放射组(8Gy)和黑蒜提取液高浓度(1.0g/ml)联合放射组(8Gy)。MTT法检测不同浓度黑蒜提取液对肝癌Huh7细胞生长的抑制效应;平板集落形成实验检测黑蒜提取液对肝癌Huh7细胞放射增敏作用;流式细胞仪PI双染色法检测药物作用后肝癌Huh7细胞周期的分布及细胞凋亡;电镜检测药物作用后肝癌Huh7细胞内自噬体的分布和数量。Western-Blot法测与自噬有关的蛋白,Beclin1和LC3与黑蒜提取液浓度的关系。结果:1、一定浓度范围的黑蒜提取液能够抑制肝癌Huh7细胞生长,且与黑蒜提取液浓度和药物作用的时间呈现相关性。2、放疗组与黑蒜提取液联合放疗组克隆形成率分别为:100%, 82.95%,31.17%, 9.71%,3.16%和 100%,86.17%,44.15%, 16.35%, 5.92%。可见,黑蒜提取液增加肝癌Huh7细胞的放射敏感性。3、一定浓度黑蒜提取液诱导肝癌Huh7细胞G2/M阻滞并增加凋亡率。4、放射组的肝癌Huh7细胞胞质内散在的分布着不同数量以及不同阶段的自噬体和髓鞘样结构。而黑蒜提取液联合放射组细胞胞质内含有更多数目的自噬体,自噬囊泡,消化不全的细胞器,髓鞘样结构。5、黑蒜提取液低浓度联合放射组及黑蒜提取液高浓度联合放射组作用肝癌Huh7细胞48 h后可上调与自噬有关的蛋白Beclin1和LC3的表达,与另两组相比差异显著,且与药物浓度呈现良好的依赖性,其中以黑蒜提取液高浓度联合照射组对Beclin1, LC3蛋白上调作用最明显,其抑制率达67. 2%;放射组和黑蒜提取液低浓度联合照射组对Beclin1,LC3蛋白表达水平也有显著上调作用,抑制率分别为51. 5%和58.4%。结论:1、一定浓度范围内的黑蒜提取液在体外实验中可以抑制肝癌Huh7细胞的生长,并提高肝癌Huh7细胞的辐射敏感性。2、黑蒜提取液诱导肝癌Huh7细胞凋亡,及细胞G2/M期阻滞,这可能是黑蒜提取液对肝癌Huh7细胞放射增敏的机制之一。3、上调自噬相关蛋白Beclin1, LC3的表达可能是促进肝癌Huh7细胞自噬及自噬性死亡的原因之一。