三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen为五加科人参属植物,具有止血、活血、抗衰老、抗肿瘤等功效,为我国名贵中药材。三七在种植过程中受到病害以及连作障碍影响,使得三七产业化受到阻碍。目前,三七病害分为两种,地上部分病害以黑斑病为主,而地下部分以根腐病为主。三七根腐病主要为真菌造成,具有传播快速、传染性强及难以快速发现并解决等特点,使得三七根腐病难以发现及防治。传统杀菌剂虽短时间内可以起到良好的抑菌效果,但对土壤水质等环境影响恶劣,进一步影响人们的健康。因此,从天然资源中寻找活性物质来代替传统杀菌剂逐渐受到国内外的广泛重视,天然杀菌剂的研究和开发日益重要。本文以三七根腐病菌为研究对象,考察丁香提取物中主要成分丁香酚对三七根腐病菌的抑菌效果,对三七根腐病菌的盆栽防效作用,以及对鲜三七贮藏过程中品质的影响。采用RNA-Seq技术分析丁香酚对三七根腐病菌基因转录水平的影响,从分子水平阐明丁香酚对三七根腐病的抑制作用机制。主要研究结果如下:1.从三七根腐病感病植株中分离出6种真菌,经过16s r DNA测序,显微观察、系统发育树绘制,判定为细极链格孢、白地霉、黑附球菌、扩展青霉、腐皮镰刀菌、尖孢镰刀菌。选取尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、扩展青霉为研究对象开展抑菌实验,通过药敏纸片法筛选中药提取物的抑菌作用,发现丁香提取物对其具有良好的抑菌效果。同时,GC-MS分析表明丁香提取物的主要成分为丁香酚。2.丁香酚对3种三七根腐病菌具有良好的抑菌效果。丁香酚处理尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、扩展青霉的最小抑菌浓度（MIC）分别为0.46 mg/m L、0.42 mg/m L、0.48 mg/m L,具有较好的抑菌效果。丁香酚对3种三七根腐病菌的细胞完整性造成破坏。随丁香酚浓度上升,细胞完整性破坏越严重。高浓度丁香酚处理3种三七根腐病菌后,胞外可溶性糖、总蛋白、细胞膜电位均高于空白对照组,且呈现浓度依赖性。说明那丁香酚可以通过破坏细胞完整性从而起到抑菌作用。3.丁香酚能够抑制3种三七根腐病真菌的能量代谢。丁香酚能够抑制尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、扩展青霉的TCA循环中的苹果酸脱氢酶（MDH）及琥珀酸脱氢酶（SDH）的活性;降低ATP酶活性及ATP的含量,从而迫使糖酵解过程中的6-磷酸果糖激酶（PFK）活性上升,为细胞供能。丁香酚能够通过抑制3种三七根腐菌的能量代谢相关通路而起到抑菌作用。4.丁香酚可以改变腐皮镰刀菌的基因转录水平。采用IC50浓度丁香酚处理腐皮镰刀菌进行转录组测序分析,发现存在显著差异表达的基因数目为4094个;在丁香酚处理组中显著上调表达的基因数目为2131个;显著下调表达的基因目为1963个,其中包括与能量代谢与细胞增殖相关的基因下调。说明丁香酚作用使得腐皮镰刀菌中能量代谢、细胞增殖相关基因的转录水平发生改变,从而起到抑菌作用。5.丁香酚对腐皮镰刀菌为致病菌的盆栽防效作用较好。丁香酚有效抑制了腐皮镰刀菌导致的叶片发黄脱落,显著提高了三七叶片中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）及多酚氧化酶（PPO）活性;降低了三七叶片中丙二醛（MDA）含量及过氧化氢（H₂O₂）含量;提高了腐皮镰刀菌造成的叶片光合速率及光合色素含量的降低;对14天盆栽过程中三七根系活力影响较小。6.丁香提取物及其复合物对鲜三七采后贮藏效果较好。经过丁香处理后的鲜三七中可溶固形物、水分均高于未处理鲜三七;丁香处理后鲜三七中MDA含量低于未处理鲜三七,而其SOD、CAT、POD等抗性酶活性均高于未处理鲜三七。说明丁香提取物可以有效提高三七贮藏期间的品质。综上所述,丁香酚能够通过破坏真菌细胞完整性、抑制真菌细胞能量代谢以及影响真菌转录水平而有效抑制三七根腐病菌,并提高鲜三七贮藏过程中的品质。