不同比例壳聚糖温敏凝胶生物学性能及促牙周再生的体内外初步研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:zmc02302
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背景牙周病作为一种口腔内感染性疾病,由于它发病率高,对牙周支持组织造成严重破坏,是目前造成成人失牙的主要原因。如何使失去牙周组织得以再生,恢复牙周组织正常的形态和功能是牙周病研究的重点和难点。将组织工程技术和研究成果引入牙周治疗研究中,为牙周病的治疗提供了新的方法。组织工程主要研究种子细胞、支架材料、信号分子之间的相互作用及效能,将三者单独或者联合运用于牙周病治疗中,均可使牙周再生成功的可能性提高。但种子细胞来源、使用浓度,支架材料来源和生物相容性,信号分子的作用机制等问题至今仍不十分清楚。最近几年,将壳聚糖温敏凝胶作为一种生物可降解材料越来越引起研究者的关注。它被广泛用作药物载体、支架材料、伤口愈合等方面。温敏凝胶在人的正常体温下(37℃)下变成凝胶,生物相容性好,利于细胞粘附和增殖。目前一般壳聚糖温敏凝胶中壳聚糖和甘油磷酸钠之间的体积比是9:1,而有人研究当两者比例在7:1、pH为7.2时,在37℃下凝胶时间为10min,将其作为注射型支架材料,更适合细胞增殖和粘附,并且方便操作。目的制备不同比例的壳聚糖温敏凝胶并且检测比较其理化性能,通过体外和体内实验比较不同比例凝胶材料的生物相容性、牙周组织再生潜能,从开发研究组织工程支架材料的角度,对壳聚糖温敏凝胶促进牙周及口腔组织再生的可行性做初步评价。方法和结果1不同比例壳聚糖温敏凝胶的制备及理化性能研究各取1ml浓度为56%(m/v)β-GP逐滴加入9ml和7ml的壳聚糖盐酸溶液中,搅拌10min,获得9:1和7:1壳聚糖/β-GP溶液。在37℃水浴中形成凝胶。通过比较凝胶时间、粘度变化、溶胀率、降解率、微观结构等观察指标来评价二种凝胶的理化性能差异。结果显示:9:1组的凝胶时间长于7:1比例组;9:1组的粘度大于7:1组;9:1和7:1组的溶胀率无明显差异;9:1组比7:1组降解慢;9:1组和7:1组的凝胶孔径无明显差异。2不同比例壳聚糖凝胶对人牙周膜细胞的生物相容性影响将人PDLCs复合壳聚糖凝胶,比较9:1组和7:1组壳聚糖凝胶对PDLCs粘附、增殖影响,评价材料的生物相容性。DAPI染色显示细胞在壳聚糖凝胶表面和内部的粘附、增殖,MTT法比较两种壳聚糖凝胶浸提液对细胞增殖的影响。结果显示:9:1组和7:1组壳聚糖凝胶都能促进人PDLCs的粘附和增殖,两者之间无明显差异,均具有良好的生物相容性。3不同比例壳聚糖凝胶促牙周损伤修复的体内实验建立狗第二、三前磨牙的III度根分叉缺损模型,将9:1组和7:1组壳聚糖凝胶分别注入狗牙周缺损区,12周后通过大体观察、X线、CT、组织学比较两种比例壳聚糖凝胶对牙周组织缺损修复的影响差异。结果显示,9:1组和7:1组均能促进牙周组织再生,具有良好的生物相容性。结论9:1组和7:1组壳聚糖温敏凝胶均具有良好的理化性能,体外实验表明两组都可以作为支架材料提供一个三维空间环境利于细胞的生长,促进PDLCs粘附和增殖,体内实验表明两组都具有良好生物相容性、可降解性,可促进牙周组织缺损的修复和再生,有望作为新型可注射型支架材料用于牙周再生的深入研究和临床开发。
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