蜂胶中含有丰富的黄酮类成分,具有良好的保健功效,能够预防和治疗一些慢性疾病,如免疫力低下、肿瘤、糖尿病和延缓人体衰老等。采用不同方法提取蜂胶,得到活性成分差别较大,直接影响蜂胶的功效。本文以蜂胶中的黄酮类物质为研究对象,分别比较了传统浸泡法、超声波辅助提取法和超临界提取法三种提取方法处理后,蜂胶中黄酮类物质的组成,测定了提取物的体内和体外抗氧化活性,并探究了其在大鼠体内的代谢机制。主要研究结果如下:1.采用响应曲面法优化超声波辅助提取蜂胶中黄酮的工艺,得到最优工艺参数为:频率为20 k Hz的聚能超声波,超声时间18 min,超声功率100 W,占空比75%,液面高度4 cm。此条件下,提取得到的蜂胶总黄酮含量为39.06±0.48mg/g。2.利用HPLC-ESI-QTOF-MS定性分析蜂胶中的黄酮类物质,共鉴定出36种酚类化合物,包括14种酚酸及其酯类衍生物:咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、异阿魏酸、3,4-二甲氧基肉桂酸、咖啡酸苄基酯、咖啡酸异戊二烯酯、咖啡酸苯乙酯、咖啡酸肉桂酯、p-香豆酸苄基酯、p-香豆酸异戊二烯酯、p-香豆酸苯乙酯、p-香豆酸肉桂酯、p-甲氧基肉桂酸肉桂酯;22种黄酮及其衍生物:5-甲氧基白杨素、5-甲氧基短叶松素、槲皮素、短叶松素、3-甲氧基槲皮素、山奈酚、芹菜素、异鼠李素、甲氧基木犀草素、二甲氧基槲皮素、3,7-二甲氧基山奈酚、7-甲氧基槲皮素、松属素、3-O-乙酰基短叶松素,白杨素、高良姜素、山奈素、5-甲氧基高良姜素、3-O-丙酰基短叶松素、3-O-丁酰基短叶松素、3-O-戊酰基短叶松素、3-O-己酰基短叶松素。并采用HPLC法定量分析传统浸泡法、超声波法和超临界法三种提取方法提取的蜂胶中黄酮类物质含量。结果表明三种方法提取的蜂胶中黄酮类物质的组成相似但含量差异较大,其中超声波法提取的蜂胶中各种黄酮类物质含量最高,浸泡法次之,超临界法最低。3.采用体外和体内抗氧化模型分别测定不同方法提取的蜂胶提取物对自由基的清除能力和对D-半乳糖诱导的氧化损伤的修复能力,并利用大鼠模型,通过HPLC-ESI-QTOF-MS分析蜂胶中活性成分在大鼠体内的代谢过程。结果表明传统浸泡法和超声波法提取的蜂胶提取物具有相同的抗氧化能力,而超临界法提取的蜂胶提取物抗氧化能力较弱。通过测定大鼠血、尿中的蜂胶代谢产物,发现不同方法的蜂胶提取物,黄酮类物质是其主要生理活性成分,且在大鼠体内具有相似的代谢途径,黄酮类物质主要通过磺酸化和葡萄糖醛酸化路径进行代谢作用。