高尔基体磷酸蛋白2(GOLPH2, GP73)是的一个功能未知的高尔基体二型跨膜蛋白,定位在高尔基体顺面,并能够通过细胞内膜系统转运分泌到细胞外基质。临床和病理研究表明,GOLPH2与疾病关系密切,尤其在肝炎肝癌和肝炎患者中发现有GOLPH2异常高表达,并且能够分泌到血液,从而可能作为临床诊断肝癌的血清学标志物。目前关于GOLPH2异常表达的研究主要集中在临床研究方面,而针对GOLPH2在肝炎和肝损伤中异常表达的细胞和分子机制研究较少,这限制了GOLPH2在临床上的应用和价值。本研究主要应用动物和细胞模型,研究GOLPH2在肝炎和肝损伤过程中异常表达的过程和部分机制,并初步探讨了GOLPH2异常表达的意义。应用肝炎动物模型和肝损伤动物模型,可以跟踪肝炎和肝损伤的发生和进展过程。研究发现GOLPH2对肝炎和肝损伤的反应非常迅速和灵敏,肝脏受到LPS或者CCl4刺激后24h内,GOLPH2表达水平就迅速升高,并在损伤后48h,达到高峰;同时肝炎以及肝损伤修复进入尾声时,GOLPH2水平缓慢下降,GOLPH2水平的下降可能还与愈后相关。GOLPH2在肝脏炎症反应中的异常表达可能是炎症因子(细胞因子)的调节结果,使用细胞因子体外刺激小鼠原代肝细胞以及肝癌细胞系Hep3B细胞,检测GOLPH2表达。结果显示IL-1b以及IL-6有上调GOLPH2的作用,而TGF-b能够显著下调肝细胞GOLPH2表达水平;没有检测到TNF-a以及IFN-r对GOLPH2的调节效果。这部分研究结果表明GOLPH2可能与肝炎过程中免疫细胞分泌的IL-1b、IL-6表达水平升高相关。为了进一步研究GOLPH2在肝炎中表达是否存在生理意义,我们第一次构建和使用了GOLPH2基因敲除鼠模型,使用Cre-Loxp系统敲除GOLPH2基因外显子5,结果显示GOLPH2存在一种尚未发现的新的可变剪接方式,外显子6的5’端存在2个剪接位点,使得GOLPH2可以选择两个不同的位置连接外显子6,属于可变剪接中的可变3’端剪接方式。由于事先未知的可变剪接的存在,使得GOLPH2敲除鼠变成了外显子5缺失的突变鼠,本研究初步研究了外显子5缺失突变对个体生殖发育有影响,并可能降低了肝脏应激能力。综合研究结果显示,肝脏GOLPH2异常表达可能是肝脏的一种应激形式,并与损伤修复过程密切联系,可能参与了这个过程,同时GOLPH2有较强的应对突变的能力,我们发现了GOLPH2新的可变剪接模式。