海萝藻中类菌胞素氨基酸的提取与抗氧化保湿特性研究

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海萝藻是我国优势经济藻类之一,具有独特的药理和工业利用价值。海萝藻具有清凉消食、消炎去湿的功效,其丰富的琼胶具有一定的黏性及延展性,其抗氧化抗炎功效与琼胶密不可分。随着臭氧层空洞出现,到达地球的紫外辐射越来越强,环境日益恶化,越来越多的病症威胁着人类的生命安全,从具有药用价值的食源性材料中寻找安全有效的紫外辐射防护剂、抗氧化剂及保湿剂成为人们关注的热点。类菌胞素氨基酸(MAAs)是天然高效的紫外线吸收物质,在海洋生物体细胞内常见,用于保护水生生物免受辐射伤害。MAAs是以环己烯酮为基本骨架缩合不同氨基酸形成的一类水溶性功能氨基酸物质,具有分子量小,摩尔消光系数高,在310-360nm处有最大吸收峰的特点。其紫外光防护作用得到公认,关于其它活性方面如抗氧化抗炎的研究也在陆续报道中,海萝藻中含有MAAs类物质,且海藻多糖大多具有吸湿保湿功效,但鲜见国内专家学者研究报道海萝藻的紫外辐射提取物以及提取物的特殊功效。本文重点研究广东产海萝藻中的MAAs的提取,包括MAA种类与提取工艺优化,海萝藻中MAAs的抗氧化活性、吸湿保湿特性,以期为海萝藻的更高值化利用提供理论建议,也为MAAs在医药卫生、食品日化、水溶性涂料等行业的应用提供一定参考依据。主要研究内容与结果如下:1.为探究海萝藻中类菌胞素氨基酸(maas)成分的种类,采用紫外分光光度法、高效液相色谱法、高分辨液质联用技术对海萝藻甲醇提取物进行了分析。结果表明,海萝藻甲醇提取物在332-334nm出有最大吸收峰,经液相色谱检测分析其中存在5种疑似maa成分,lc-q-tof-ms分析证明检测到的5种成分均是maa成分,分别是shinorine、mycosporine-2-glycine、asterina-330、porphyra-334、deokygadusol,其中shinorine是主要成分,占总含量的98.3%;2.为了最大程度提取海萝藻中maas成分,采用甲醇溶剂超声浸提法,通过单因素实验确定超声温度、超声时间、液料比、甲醇浓度、提取次数的最佳范围,并用响应面法进一步优化提取海萝藻中maas的工艺参数。在单因素实验的基础上,采用box-behnken实验设计优化出超声法提取海萝藻中maas类化合物的最佳提取工艺条件为:超声温度为41℃,超声时间为81min,液料比为67ml/g,甲醇浓度为12%。在此条件下预测maas的提取率为1.3115mg/g,实际提取率为1.3064mg/g,传统法提取率仅为0.9002mg/g,该方法比传统提取法效率提高了45.12%。3.海萝藻maas提取物体外抗氧化特性测试:海萝藻maas粗提物存在良好的体外抗氧化性能,海萝藻maas对·o2-、·oh均有一定的清除作用且清除率随浓度增加而增大,其ic50值分别为2.73mg/ml和7.71mg/ml,对dpph的ic50值为13.679mg/ml。当粗品浓度为14.920mg/ml时,对羟自由基的清除率能高达90.45%,且maas提取物在常温见光状态下相对稳定,这为海萝藻的进一步应用提供理论依据。4.海萝藻MAAs的保湿特性:采用体外环境保湿测试方法对海萝藻MAAs、丙三醇、透明质酸进行吸湿保湿率测定,对添加不同浓度的海萝藻MAAs浓缩液的爽肤水与乳液进行保湿率测试与吸光度测试。结果表明,海萝藻MAAs的总体吸湿与保湿能力比透明质酸强,但略低于丙三醇;保湿时间长,海萝藻MAAs经过72h时间的检测仍表现出比丙三醇和透明质酸高的保湿率;皮肤测试证明添加了60%海萝藻MAAs浓缩液的爽肤水具有最优异的保湿效果,添加了5%~20%的海萝藻MAAs浓缩液的乳液能显著提高乳液的吸光度值,且添加量越大,吸光值越大。
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