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目的:Dravet综合征(Dravet Syndrome,DS)是一种难治性癫痫,通常由Scn1a基因的杂合突变引起,该基因编码电压门控钠通道Nav1.1。胰高血糖素样肽1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)类似物是一种治疗糖尿病的新药,近年来发现其在神经系统相关疾病中显示出神经保护作用。然而,GLP-1类似物对DS是否具有神经保护作用尚不知道。本项研究旨在探讨利拉鲁肽对Scn1a基因敲除诱导的癫痫小鼠模型与细胞模型中的神经保护作用及相关机制。方法:建立Scn1a基因敲除癫痫(Scn1a KO)小鼠模型。实验分为四组,(I)生理盐水对照WT小鼠组(WT+NS组),(II)利拉鲁肽治疗WT小鼠组(WT+Lira组),(III)生理盐水对照Scn1a KO小鼠组(KO+NS组),(IV)利拉鲁肽治疗Scn1a KO小鼠组(KO+Lira组)。利用脑电图(Electroencephalography,EEG),TSE一体化智能行为学分析系统(IntelliCage)和旷场实验(Open Filed Task,OFT)评估DS小鼠癫痫易感性、行为学变化和癫痫发作的严重程度。利用苏木精与伊红(HE)和Nissl染色观察脑组织的神经元形态学变化。应用免疫荧光法、蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测凋亡相关蛋白(Cleaved Caspase-3,BAX,BCL-2)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR,mTOR)表达情况。在Scn1a基因敲除的HT22细胞系中,分为四个组:(I)HT22细胞对照组(HT22 Control组),(II)HT22细胞利拉鲁肽处理组(HT22+Lira组),(III)Scn1a KO HT22细胞对照组(Scn1a KO Control组),(IV)Scn1a KO HT22细胞利拉鲁处理组(Scn1a KO+Lira组)。应用CCK-8(Cell Counting Kit 8)法检测Scn1a基因敲除细胞模型的增殖情况,利用倒置荧光显微镜来观察Scn1a基因敲除细胞形态学的改变,利用细胞计数器来计数Scn1a基因敲除细胞数目的变化,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测利拉鲁肽对细胞凋亡水平的影响,Western blotting分别地检测凋亡信号通路相关蛋白的表达情况与mTOR信号通路相关蛋白的表达情况。结果:1.EEG结果显示:与Scn1a KO+NS组相比,Scn1a KO+Lira组可显著减轻脑电图痫样发作情况(P<0.001);2.IntelliCage结果显示:与Scn1a KO+NS组相比,Scn1a KO+Lira组可改善癫痫小鼠学习记忆能力(P<0.001);3.旷场结果显示:与Scn1a KO+NS组相比,Scn1a KO+Lira组可缓解癫痫小鼠焦虑症状(P<0.001);4.HE与Nissl结果显示:与Scn1a KO+NS组相比,Scn1a KO+Lira组可减少癫痫发作的神经元损伤程度(P<0.001);5.CCK-8结果显示:与Scn1a KO Control组相比,Scn1a KO+Lira组可促进细胞增殖(P<0.001);6.Annexin V-FITC/PI流式细胞术结果显示:与Scn1a KO Control组相比,Scn1a KO+Lira组可减少细胞凋亡(P<0.001);7.免疫荧光实验与Western Blotting:与Scn1a KO组相比,利拉鲁肽增加了SCN1A蛋白质表达水平(P<0.001);下调mTOR的表达水平(P<0.001);上调BCL-2的表达水平(P<0.001),下调caspase-3的表达水平(P<0.001),下调BAX的表达水平(P<0.001)。结论:1.利拉鲁肽可以减轻Dravet综合征小鼠模型的癫痫发作易感性,并改善学习认知功能障碍;2.利拉鲁肽可以通过抑制mTOR信号通路来减少Dravet综合征小鼠模型中的神经元凋亡,从而发挥神经保护作用。