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目的:脓毒症(sepsis)的炎症反应/抗炎反应失衡所造成的免疫功能紊乱是导致脓毒症恶化的重要原因,针对脓毒症的免疫治疗也成为目前研究的热点,但脓毒症的免疫状态在病程的早、中、晚期表现各异,机体对不同病原体的反应模式也不尽相同,新的脓毒症指南对免疫治疗仍未有明确指向。目前关于胸腺肽α1在脓毒症中的免疫治疗研究众多,但胸腺肽α1的应用时机、应用剂量、疗程等在学术界尚无定论。回顾过去,对胸腺肽α1在脓毒症中的研究主要集中在由内毒素介导的严重脓毒症模型。然而,脓毒症患者中革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的复合感染大量存在,内毒素与外毒素之间存在复杂的协同和交互作用,我们在病原体复合感染情况下对胸腺肽α1的研究甚少;其次,任何免疫刺激治疗都应该考虑在某些情况下可能对机体造成潜在的有害影响,由于临床中缺乏对免疫状态及时又可靠的监测手段,使得脓毒症炎症亢进与免疫抑制的界限并不分明,轻症者可能尚未发生免疫抑制,此种免疫状态下应用胸腺肽α1,对脓毒症预后的影响如何?尚无可靠的循证医学依据。本实验前期建立了肠毒素B(SEB)与内毒素(LPS)复合攻击小鼠脓毒症模型,模拟革兰氏阳性球菌与革兰氏阴性菌的复合感染,经研究观察属于轻症模型,目的是探讨不同剂量胸腺肽-α1在肠毒素B(SEB)与内毒素(LPS)复合攻击小鼠轻症脓毒症模型中的免疫干预作用。方法:本实验首先建立金葡菌肠毒素B(SEB)与大肠杆菌内毒素(LPS)复合感染小鼠脓毒症模型,给BALb/c雄性小鼠腹腔注射SEB(500μg/kg、400μg/kg、300μg/kg)2h后,注射LPS(1500μg/kg、1000μg/kg、500μg/kg),并设置PBS空白组,连续观察所有小鼠72小时的存活情况及症状表现,每隔8小时记录存活率。最终确定以300μg/kg SEB+1000μg/kg LPS建立了复合感染模型。接下来将90只小鼠完全随机法平分成3组,每组30只,分别为对照组、小剂量组、大剂量组;再将每组小鼠随机分为2h组、4h组、6h组,每组10只。将所有小鼠造模后,给小剂量组小鼠腹部皮下注射胸腺肽-α1 100ug/kg,大剂量组小鼠腹部皮下注射胸腺肽-α1 2000ug/kg,对照组小鼠腹部皮下注射等体积PBS液。观察并记录各组小鼠的症状,直至相应的时间终点2h、4h、6h,采血后离心留取血清,解剖后留取肺脏等组织用来HE染色。并用ELISA法测定小鼠血清IL-6、IL-10、TNF-α浓度。所用数据以均数±标准差((?)±SD)表示,采用SPSS19.0软件进行统计,正态性检验后做方差分析,方差齐的组间,用One-Way ANOVA法,方差不齐的组间比较采用多个独立样本的秩和检验。结果:1不同剂量胸腺肽-α1对小鼠血清IL-6浓度的影响在给药后2h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,IL-6浓度明显高于对照组,有统计学意义(P<0.05),但小剂量组与大剂量组IL-6浓度相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在给药后4h、6h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,三者之间IL-6浓度无统计学意义(P>0.05)。2不同剂量胸腺肽-α1对小鼠血清IL-10浓度的影响在给药后2h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,IL-10浓度明显低于对照组,有统计学意义(P<0.05),但小剂量组与大剂量组IL-10浓度相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在给药后4h、6h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,三者之间IL-10浓度无统计学意义(P>0.05)。3不同剂量胸腺肽-α1对小鼠血清IL-10/IL-6比值的影响在给药后2h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,IL-10/IL-6比值明显低于对照组,有统计学意义(P<0.05),但小剂量组与大剂量组IL-10/IL-6相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在给药后4h、6h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,三者之间IL-10/IL-6比值无统计学意义(P>0.05)。4不同剂量胸腺肽-α1对小鼠血清TNF-α浓度的影响在给药后2h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,TNF-α浓度明显低于对照组,而且小剂量组明显低于大剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05);给药后4h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,TNF-α浓度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),小剂量组与大剂量组之间相比无统计学意义(P>0.05);给药后6h,小剂量组、大剂量组与对照组相比,TNF-α浓度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),小剂量组与大剂量组之间相比无统计学意义(P>0.05)。5不同剂量胸腺肽-α1对小鼠临床表现的影响对照组小鼠在造模后4h内均出现了立毛、呼吸急促、不饮食、腹泻、精神萎靡、对周围环境失去兴趣、自洁行为消失,眼睛出现痂样渗出等现象,直至观察终点6h,症状仍无缓解。而小剂量组和大剂量组的小鼠与对照组相比,症状相对较轻,症状缓解出现较早:在用药后4h内,小剂量组与大剂量组小鼠呼吸急促、腹泻的程度相对较轻;在用药后5h~6h内,小剂量组与大剂量组的大部分小鼠精神改善,活动增多,呼吸急促较前缓解,开始恢复自洁行为,个别小鼠出现饮食现象,对照组小鼠症状较前未见明显缓解。小剂量组与大剂量组的小鼠临床表现相似。6不同剂量胸腺肽-α1对小鼠脏器损害的组织病理学表现的影响肺组织病理:对照组可见部分肺泡壁破坏、有肺间质出血现象,小剂量组及大剂量组可见肺间质血管充血扩张,未见肺间质出血;肝组织病理:对照组肝细胞水肿,颜色变淡,小剂量组及大剂量组病变较轻;肾病理:对照组肾间质血管充血,小剂量组及大剂量组病变较轻;心组织病理:对照组偶见血管扩张充血,小剂量组及大剂量组形态学表现基本正常。结论:1胸腺肽α1有利于改善SEB与LPS复合介导的脓毒症小鼠的预后。2胸腺肽α1在炎症反应早期增强了小鼠的免疫应答,发挥了免疫调理作用。3不同剂量胸腺肽-α1的作用无显著差异,且增大剂量并未获得更好的收益。